脐带MSC真是mSC吗？还是成纤维细胞？

henryjia

都说脐带好养活，可是那些细胞似乎都是成纤维细胞，分化能力很差。我做的流式细胞检测很好，可是成指成骨分化很差。9 j, O) U) v; X, c! A! o" Q! x6 u
( e$ j6 ]  b+ z4 z0 `, W+ Q! p
请指教

henryjia

回复 老姜 的帖子# `9 e: c7 ?2 b$ W

' f8 T' [$ y( l  G多谢指教。

老姜

回复 henryjia 的帖子' ^; N& {3 U( {0 J6 n. ~& J
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成骨诱导：５０μＭ的Ｌ－抗坏血酸；１０ｎＭ的β－磷酸甘油钠；１０ｎＭ的地塞米松；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；补足ＬＧ－ＤＭＥＭ（避光，临用前加地塞米松）．# r8 x, K% l3 t9 M! Q
成脂诱导：完全诱导液：０.５ｍＭ的ＩＢＭＸ；１００ｍＭ的吲哚美辛；１μＭ的地塞米松；１０μｇ／ｍＬ的胰岛素；１０％ＦＢＳ；２ｍＭ的Ｌ－ｇｌｕｔａｍｉｎｅ；１００ｕ／ｍＬ的Ｐ／Ｓ；维持液：１０μｇ／ｍＬ的胰岛素、每三天换一次液，第一次用完全诱导液，第二次用维持液循环三个周期，一直用维持液换液，直至镜下见脂质滴形成，为使脂质滴多点，可多养几天。

weibin2002

干细胞会因为所处的阶段不同，诱导的条件和时间也有不同吧。骨髓的可以诱导成功，说明不是试剂的问题；可能诱导剂的浓度和时间等条件还需完善吧

henryjia

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回复 老姜 的帖子
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您有没有用R&D现成的那种分化添加剂？
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6 Y! n9 b# P, {; N& ~# R我做的可以观察到酯化液滴，但是很少。成骨很弱。
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细胞形态非常好，流式结果也很好。所以很郁闷。% h8 R* @  }7 k0 E  ]7 t0 J, k

/ E9 v" R" e! a* Y% p) ~5 y是否可以请教您的分化配方吗？ 4 A) p1 Q' d4 K4 A) W8 n4 Q% g
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请您指教。多谢* T5 V8 [, X) J/ Y' s2 O

老姜

回复 henryjia 的帖子* I7 `# q: M7 o

: O& t; b2 r# H5 H( V脂肪诱导技巧：使用质量差的血清诱导脂肪分化相对快点，诱导约２０－３５天；6 f" l7 ~. u! p! R2 p7 R" o
成骨诱导技巧：避光！试剂，换液均避光，少在显微镜下观察，多个样本时只观察一个样本，诱导约２０天以上。

老姜

回复 henryjia 的帖子3 o; f) t+ e0 X  a: {" ]# ?

  E! g3 ]3 [/ n. ^- j6 ^# B/ c9 b分化培养液配方是文献常用的就行。培养液为ＬＧ－ＤＭＥＭ，血清是Ｇｉｂｃｏ澳洲产的。

henryjia

回复 老姜 的帖子  n5 N" A# A" Y* X; y& r

: d5 u& p& ^/ t) U8 p我对文献持怀疑态度，不知道各位同仁有没有自己试验成功的。7 {" f  F3 {% G" k, W

3 p0 n) b) P! N5 c" ~" S很想知道，是不是真的可行。唉，进展缓慢，急呀！

henryjia

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9 ~. R, H* j) }+ h% `5 z我至少试了三个样本，成骨成脂最长达3周。

henryjia

回复 jack1381818 的帖子
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3 \9 q! \9 Z# l能请教你是用的什么培养基养脐带MSC吗？分化实验培养基是那种？分化时间有多长？" [: G1 F! l; U4 ?3 h
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是不是不能用骨髓MSC 的分化方法？