蛋白电泳上样量问题

微笑流滢

大家好，做Western跑胶时，所有要检测的蛋白都必须保证上样量一样吗？比如，要检测一个好做点的蛋白和比较难做的蛋白（如Actin），可以难做的蛋白加大上样量，而那个比较好做的蛋白少上点样吗? 每一次电泳所有样品的上样肯定一样的

微笑流滢

回复 sszxlijin 的帖子
" t- L3 [  U; V7 l0 v! g$ j4 z/ w1 z1 k9 W; h$ W  _3 @+ m
嗯，如果是检测一个蛋白，所有样品的上样量肯定是一样的，可是假如遇到不好做的蛋白。太小的上样量可能做不出来，所以可能会加大上样量。这样可以吧？？？还是，，，，，，，

微笑流滢

回复 芦苇浅 的帖子4 f1 B2 D8 N* M2 k9 S9 h

( i( r) E$ a" q% l1 O/ ^  b. @每个孔中蛋白的量肯定是一样的，但是有些蛋白如Actin好做，上5ug蛋白就可以出来结果，但是如果不好做的像磷酸化蛋白，每个样品上40ug 都不一定能做的出来，所以如果是同一批蛋白，就想多加一些蛋白把不好做的做出来。这样可以吧？我们老师说检测Actin和检测不好做的蛋白如磷酸化蛋白时必须保证所有样品都是5ug上样，可这样的话，磷酸化蛋白真不好做出结果那

微笑流滢

回复 sszxlijin 的帖子# Y1 h& F4 e6 {; s& Y
2 W0 R7 ]; f: f6 `  D1 p/ E' K
谢谢你