细胞冻存与复苏

jiguojie87

     1、细胞冻存一般取5代以内的细胞比较好，我们都是用2代的。! p: P1 _4 @" Y
      2、冻存前细胞贴壁达到90%左右，如果时间再长会影响细胞的活性，但是时间短的话就太浪费了。# U6 m9 e9 B/ N3 w1 D2 U
      3、根据细胞量冻存，大概1*10的7次方一管，每管1ml。冻存液：血清：DMSO：DMEM=3:1:6冻存体系,我们现在改成血清替代品了。配好的冻存液最好预冷使用。
* [) G( |" T6 d- B9 ~      4、4℃ 0.5h，-20℃  2h，-80℃ 过夜，第二天液氮保存；" y3 _# A5 W- H! d; @
      5、复苏细胞时候39℃复苏，时间尽量短。
6 L0 F9 s( S4 M, J0 k      6、复苏细胞种瓶/种皿的密度？& z1 g) M, L6 _2 t+ L0 l( O3 o' D/ `, k4 J/ |