求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension
: {4 E: ~8 L3 Q# s6 ]# N/ fhttp://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

回复 jiaozi 的帖子& t* F1 I5 Q7 Y. R

9 j9 ]9 |' q% z2 K理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

回复 wangshumin12311 的帖子
9 E+ ]" \( m% h5 ]/ M5 Z9 V6 t/ b' W: b) |/ a! V, e
因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子4 f* t3 x- Y0 y" o& ~1 T& w

5 G& a; k( ~8 g: Y' u; ]我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子& k1 b) o2 z/ C* |, b" U
7 Q  h, t* i; }2 w! Y4 n5 J$ t
如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

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, p4 A6 @5 o$ C5 s
5 |3 ]' ~& l& b' t# c& [+ U" WMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

回复 Jonathan 的帖子; l* z4 }( M7 G" a1 z; I
" _* }/ |/ c! w1 ?" _
做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧