求讨论：悬浮细胞诱导iPS

DNAngle_RNA

最近在做关于悬浮细胞诱导iPS的实验，求高手介绍经验，指点迷津！

jiaozi

你好，请看附件的文章，是广州生物医药与健康研究院所长的文章，是关于评论悬浮细胞诱导ips题目为reprogramming in suspension3 u, a* D% |, W6 \( d/ s
http://pan.baidu.com/share/link?shareid=502077&uk=236230318

DNAngle_RNA

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5 a! |& w3 E/ c4 w/ q0 `) Z; S! n
理论讲的很好，但是太抽象了，解决不了我现在遇到的问题……

wangshumin12311

问楼主，悬浮诱导意义何在，能解决神马问题

DNAngle_RNA

回复 wangshumin12311 的帖子) t+ A: I, ]' Q7 C

2 Y. o0 M# _# h4 M1 A$ U/ v; B3 l因为很多细胞是要悬浮培养的，比如血液类细胞

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子8 N' \, u( @5 E! C! M; ]

0 n$ E  {$ `  @2 l我做ips这么久了。血液细胞悬浮诱导已经是轻车熟路了。直接分离，然后用nucleofetion，转那几个episomal的因子，然后扔到matrigel或者feeder上面。一个星期就有ips克隆了。

DNAngle_RNA

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- ?! {1 u, F& f
; S1 Y0 B- Q; ^5 _. i0 X如果是用慢病毒呢？做了两次，感染效率很低，只带GFP的慢病毒感染效率也很低，请问有没有提高感染效率的方法？谢谢

Jonathan

回复 DNAngle_RNA 的帖子. e0 \, m$ ^. K( _

- `: u) i8 z' Y- m6 z) G" m% wMOI多少？慢病毒我也做过，效率很好的

DNAngle_RNA

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9 x: k, |) ?" f" ?7 v7 c
1 k4 ^+ ^( A( J5 B1 U  v做过梯度，5，10,20,50MOI，效果都不太好，慢病毒是买来的，质量肯定没问题

老十

这个natureprotocol上有文章介绍吧