关于二抗IgG、IgM的选择，请问要分亚型吗

xiangyu83

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第一个问题： 是的。二抗必须指向一抗同型。3 E$ k8 A1 g4 R# }4 q4 B( K
第二个问题：一般实验不必区分亚型。IgG类的二抗是通用二抗，可以和各个不同亚型IgG结合。; Y" _( j3 I- M7 L
以下是一些常识（copy）:" m7 L$ y& F4 n$ m+ U' N* y. I
二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白，因此相应的二抗就是抗IgG抗体.
7 S0 Y+ K- D7 ^: w# v单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品列表中列出，如果你的一抗是小鼠IgM，那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM，或是抗小鼠IgG抗体。
: ?! |  L5 K# V: D: }如果单克隆一抗是小鼠IgG的某一亚类（IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3），那么几乎所有的抗小鼠IgG都可以与之结合，或者你也可以选择专门针对这一亚类的二抗，例如，如果你的一抗是小鼠IgG1，那么你可以选择抗IgG1的二抗，此种抗体在双标记实验中尤其适合。: U7 R6 L- d2 V  T, V" r' J
如果你不知道一抗是哪一类别或亚类，那么抗小鼠IgG是一个不错的选择，因为此种抗体可以识别大多数类型的IgG免疫球蛋白。

xiangyu83

目前绝大多数一抗都是IgG，比较成熟。个人意见，不是实验必须需要，选择IgG的一抗即可。

xiangyu83

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; l1 n5 R% p8 p8 _3 V. t! J不清楚为什么必须用小鼠来源一抗，你的组织或细胞是什么来源的？

xiangyu83

回复 请叫我晓白 的帖子# y2 E' y# f3 _( ]% `/ d- a/ x

. s, u+ A, {& D4 ^- k+ }一抗来源是兔和小鼠，那么你二抗分别选择抗兔和抗小鼠的就可以了吧，两个二抗分别标记不同颜色荧光。两个一抗可以同时孵育也可以分别孵育，需要摸索条件。经验是特异性结合能力弱的先孵育，再加特异性结合能力强的一抗。二抗一般不需要分开孵育。