神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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* Y/ r1 h4 m) x7 L/ t
0 ]% X# K3 P1 N" {" z我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc& c* F3 s/ [5 m8 y' M5 b4 t
完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家
3 F7 `" J4 Z7 g5 t# P0 t: i2 G4 M' U
采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿; h7 v1 `9 M( h+ d5 L2 K1 ~
1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™
5 a2 Y2 @! C( `CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
4 }& b4 ^7 |1 @. w' r& F" B注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。6 X# @; q: |  V2 a: N: e% ?5 ^) p
2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm
( ?% [* |; {/ Z/ K, O培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。$ E+ s0 [2 N, L' H& D/ S
3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。' L: h9 t. D' L. C3 |
4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。% ~5 |# \& g: ?5 D2 y
注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。; w$ c* p* x6 X9 \0 K8 `

/ M! f0 T: F6 Y. _0 J/ y4 V1 k& T采用纤连蛋白包被培养器皿5 a5 J3 l7 Q$ m- K& R
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。
; j( u/ c; G$ Y2 x2. 将工作液置于-20°C下保存待用。
1 l* b" P6 E8 s* T/ o2 q1 c) ~3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
0 L0 Q, b3 s3 {* r4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-/ a/ Y  R4 p: d
mm培养皿: 1.5 mL) 。! B8 s6 M% m" `- }4 Z9 j6 P* v3 y& r
5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。3 I3 l) M: C" c2 B: K/ q5 c. H
6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
. ~. h1 ^5 w8 W5 }) I) d7 o  G& Y注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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0 Z9 M! |! a& D% c/ O* r
非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

回复 changbo529 的帖子. \6 r2 n( b1 F8 T( g

! Q% B" h! n- Y& B$ ?我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。0 h5 L1 @& \2 h" |' H1 N" v
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http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html