神经干细胞培养包被物的选择

changbo529

各位前辈您们好：小弟想请教下三种包被物多聚赖氨酸、层粘连蛋白和纤连蛋白对神经干细胞培养的影响。请多多指教，不胜感激，谢谢

Life_Tech

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9 |9 K. E7 m  A' U! O; L0 Q# z, X
: M7 P# O! k! o) D5 g: _我们推荐纤连蛋白或CELLstart™ CTS™配制基质，可参考该链接中的实验方案lifetechnologies.com/neuroprotocol/hnsc
3 U, U! Z* H0 L3 ~; u完整的实验方案已汉化，稍后分享给大家
3 v& c+ v( w+ f6 D7 h6 ^( L2 a$ p3 G2 K8 _  u2 S  \6 }1 J# b5 d
采用CELLstart™ CTS™包被培养器皿
4 }# E3 B8 x7 t8 `1. 用含有钙和镁的D-PBS以1:100稀释CELLstart™ CTS™ (如，50 μL的CELLstart™5 w: Y3 a+ @$ ?5 K. Y. C
CTS™稀释至5 mL的D-PBS中) 。
* h' k0 B; ?; E2 k6 Y" ~  N$ D* i注：CELLstart™ CTS™ 不得冷冻、涡旋振荡或剧烈搅拌，否则可能形成凝胶。
) X( E  e7 Y9 b: I) @2. 用CELLstart™ CTS™工作液包被培养器皿的表面 (T-75：14 mL，T-25：7 mL，60-mm  C( {) b) }/ U& x. l0 G
培养皿：3.5 mL，35-mm培养皿：2 mL) 。+ w# c5 Y7 p8 L
3. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中孵育1小时。
: d  n1 K' j6 {: n/ k: F4. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除所有CELLstart™ CTS™溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
* T: r1 p8 h+ B( g0 f& w注：您可以提前包被培养板，置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2周。直至使用前，切勿去除CELLstart™ CTS™溶液。确保培养板不变干。/ G( s+ {- K/ t6 ]

! s3 a& |4 H- u* C5 t% q采用纤连蛋白包被培养器皿2 `4 J" H% v2 I1 Z2 c" L
1. 用蒸馏水稀释纤连蛋白，配制成1mg/mL的储存溶液。
4 H7 J- ~2 \2 u# o$ |8 O2 e0 O2. 将工作液置于-20°C下保存待用。
5 f6 h- J" f- D# _4 z' @2 Y- y3. 将储存溶液加入D-PBS中，配制20 μg/mL的工作液。
  d0 x7 t/ z$ H5 x  g4. 加入足量的工作液，覆盖培养器皿的表面 (T-75: 10 mL，60-mm培养皿: 2.5 mL，35-
4 y; `9 s3 _0 N* b- k* N5 Mmm培养皿: 1.5 mL) 。
1 K2 ?: c* q$ Q0 P5. 将培养器皿置于37°C、5% CO2环境中培养1小时。( b7 t  ~: L, Z) X/ w
6. 从孵箱中取出器皿，储存待用。使用前去除纤连蛋白溶液，在器皿中加入StemPro® NSC SFM完全培养基。
' L' {( ]* h! a; a/ x2 f注：您可以将纤连蛋白处理的培养板置于4°C下储存，用Parafilm®密封包裹，至多保存2 周。确保培养板不变干。无需清洗步骤，吸取多余液体后可直接使用培养皿。

changbo529

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# ?+ @0 R' a# @6 ?1 [9 F& G  J
, i( K; u; `6 r; y* f' F5 M非常感谢老师细心的指导

Life_Tech

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# j9 D) D, h' \0 r0 ?- w: A- p+ n
我们现在可以提供中文版神经生物学研究的17个实验方案了，欢迎来申领哦。见以下链接中的帖子。7 d: y3 h" j8 W* N- r
( e! J; E$ n- [, p9 B! p
http://www.stemcell8.cn/thread-72983-1-1.html