求教胎盘干细胞传代时酶消化的程度

chenzhengliang

各位大神，请问下胎盘干细胞做传代培养时，加入胰酶消化，大概什么程度多长时间可以加血清培养基终止啊，消化5min后显微镜下看到细胞变圆，变小，是不是这时就可以终止消化了？

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5 n  `6 U: j3 ?, r6 C是的 把胎盘组织剪碎 37℃消化  随时注意镜下观察 当细胞开始变圆 有少部分脱落时加血清终止消化 稍微振荡 过滤 观察细胞是否大部分脱落 必要时重复消化一次 离心收集细胞

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回复 chenzhengliang 的帖子0 f5 B8 Y5 }  v6 {4 l, a
% }8 h: _" m. }: C, m3 i
你用0.25%胰酶？如果是0.25%胰酶，用不了1分钟就可以终止。
, Z4 H, j+ [6 ]; G0 a如果用0.125%胰酶，可能需要5分钟。
5 S6 v, A; d8 Z  [8 N4 l+ e消化时在镜下观察，细胞皱缩，轻轻一拍，细胞脱落，即可终止消化。

piano尤尤

我用的商品化0.25%胰酶 1min 最多1分半 , y3 |8 O. e7 v! H  L! k2 @8 B
只要细胞稍微变化 没有那么铺展 就终止0 p) I( @7 L6 m) s2 Q
对于各种间充质我都是这么处理
/ w, |) X8 K0 `9 b2 b  g不然传代后贴壁下来状态很差3 U" p+ L* y2 U2 N9 p. w+ l

wangbo19880315

在显微镜下观察到细胞之间分开就可以了，终止消化过程要快，要按照加胰酶的先后顺序终止消化！不然会导致消化不均一！

孙帅帅

我们用的0.05%的胰酶，37℃消化一分钟就可以了啊~~

枫之叶影

我们用0.125%的消化4分钟能脱落80%到90%，吹打下就OK了