胎盘干细胞酶消化问题

chenzhengliang

论坛里看了好多帖子，对于酶消化法培养胎盘干细胞有好多做法，有的是单用胰酶，有的是胶原酶（胶原酶中还有几个类型），有的是两个连着用。不知道到底哪一种酶消化胎盘分离的干细胞更多更好点，求各位前辈分享心得。

zhangjieyctc

我们都用胶原酶Ⅱ型的，浓度1%，效果不错

yangweirenhao

胶原酶1，2，4都可以，二最好一稍差四最差

ganggangtry100

用胶原酶吧，组织块不要太大，37度，根据组织块的消化情况，适当延长消化时间，消化结束后，可洗涤或高速离心，均能得到不少细胞的。

chenzhengliang

回复 ganggangtry100 的帖子( N( n7 L$ ]: X' a* l

7 Z$ s5 o0 l$ s0 V' s, h. [" u4 N' H4 |消化结束不需要用100目不锈钢网过滤吗，直接离心就行吗？

ganggangtry100

可以过滤的。不过，把握消化时间，几乎可以收到单个细胞的，培养中的很小组织块是不影响结果的，而且，有时小的组织块也会有细胞爬出的，说不定是个意外收获。

chenzhengliang

回复 ganggangtry100 的帖子
* I- W  ~, f/ m4 R$ B3 Y2 ?
" I9 K+ o+ P" |* B( O谢谢分享，下次试试。

CELL007

消化后要过滤的，毕竟在剪的过程中会有一些稍微大的组织块；然后再离心收集细胞，重铺就OKl了。

chenzhengliang

回复 CELL007 的帖子* Y2 X& ^8 q! B8 v. G/ l/ V( U
) v  M& d" ]; U7 \6 b, g/ _
那我想问一下，要是消化后有很多较大的组织块，过滤时未滤过的部分应该也有不少细胞，要不要把滤渣重滤下，要的话，用什么滤？谢谢！

CELL007

第一，用剪刀剪的时候要尽量碎；第二，过滤可以用100微米的筛网（BD)就可以。