胎盘干细胞酶消化问题

chenzhengliang

论坛里看了好多帖子，对于酶消化法培养胎盘干细胞有好多做法，有的是单用胰酶，有的是胶原酶（胶原酶中还有几个类型），有的是两个连着用。不知道到底哪一种酶消化胎盘分离的干细胞更多更好点，求各位前辈分享心得。

zhangjieyctc

我们都用胶原酶Ⅱ型的，浓度1%，效果不错

yangweirenhao

胶原酶1，2，4都可以，二最好一稍差四最差

ganggangtry100

用胶原酶吧，组织块不要太大，37度，根据组织块的消化情况，适当延长消化时间，消化结束后，可洗涤或高速离心，均能得到不少细胞的。

chenzhengliang

回复 ganggangtry100 的帖子6 m0 O% |1 b8 j% T

  N: e% m$ K- Y# ?& w9 y消化结束不需要用100目不锈钢网过滤吗，直接离心就行吗？

ganggangtry100

可以过滤的。不过，把握消化时间，几乎可以收到单个细胞的，培养中的很小组织块是不影响结果的，而且，有时小的组织块也会有细胞爬出的，说不定是个意外收获。

chenzhengliang

回复 ganggangtry100 的帖子
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谢谢分享，下次试试。

CELL007

消化后要过滤的，毕竟在剪的过程中会有一些稍微大的组织块；然后再离心收集细胞，重铺就OKl了。

chenzhengliang

回复 CELL007 的帖子7 `* J! W1 y& M0 a0 p
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那我想问一下，要是消化后有很多较大的组织块，过滤时未滤过的部分应该也有不少细胞，要不要把滤渣重滤下，要的话，用什么滤？谢谢！

CELL007

第一，用剪刀剪的时候要尽量碎；第二，过滤可以用100微米的筛网（BD)就可以。