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关于EB的形成与克隆的挑取 [复制链接]

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楼主
发表于 2016-8-9 04:38 |显示全部帖子
回复 nichifanlema2 的帖子4 l# Y2 y- l' l1 n* A; ?8 ~

8 ~) ]" ]3 M! o您好,新手一枚,您说的这个方法是指把克隆吹打成小碎片,然后放在培养液里4-6天后即可自然形成EB吗?我最近在做用人ips细胞形成EB,方法是用EDTA消化掉滋养层细胞,然后收集ips细胞制成悬液,加到96孔板离心,原则上应该24小时后就可以形成EB了,但不知道为什么总是不成功,不知道您有无相关经验,请赐教,谢谢!
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沙发
发表于 2016-8-9 16:23 |显示全部帖子

标题

回复 nichifanlema2 的帖子
3 C  K7 M; L2 O1 J. J5 U# x; z
  w8 }$ Q( ^# Y8 K, R* w4 [非常感谢!我查了一下,悬滴法和悬浮法应该是不同的吧,哪种更适合人ips呢?如果采用悬浮,培养基还是用日常ips培养的液体吗?需不需要加什么特别的细胞因子?你说的加y.y是什么?我们用的是APEL,貌似不是专门的EB形成培养基。还有就是碎片大小不一,自然形成的WB大小是不是也会不一样,而且他们会太过松散吗?不好意思,问题太多,前面的人是成功的,但我做个两个多月了还没重复出来,所以在想试试别的方法,谢谢!
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