请教关于EB的形成与克隆的挑取

your1024

请教一下各位：( M7 y6 q& o6 p+ q, G& l$ W. R! F
1、如果用悬滴法形成EB的话，是使用纯的ES/iPS来进行的么？细胞量大概在多少呢？那MEF是如何消除干净的呢？- s0 O& P8 U7 M' m5 n
2、如果直接用悬浮法的话，就是把细胞消化下来直接接种到低附皿里就可以了么？是单细胞悬液么？MEF不需要清除么？
7 _8 d6 n9 }# X% o$ J% P8 t3、还有在细胞克隆形成的时候，如果需要把克隆挑取出来，各位是用的什么设备呢？普通的体式显微镜能够看到么？还是需要什么特殊的配件才可以？. ]3 C  T) _1 O( O4 C- z) ]/ W; W
谢谢各位！

your1024

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感谢回复！

your1024

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+ S$ a' R2 a+ \# Y1 k4 x回复 frankieisme 的帖子: ], e4 K1 O1 T3 L+ e
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谢谢您的详尽回复！

your1024

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想再请教一下，EB形成之后重新贴壁进行诱导培养的这个过程中有什么技巧么？我总是不能让EB很好的贴壁，要么是看着已经贴了，加液之后又重新悬浮起来；要么是放的时间长了，细胞都死了（本身带GFP的细胞，淬灭了），我用的孔板，事先用0.1%明胶铺了有几个小时。这个怎么解决呢？还想问下，如果做WB或者PCR的话，6孔板一个孔里面要有多少EB存活才好呢？谢谢！

your1024

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8 @" {. f: w9 n; m4 }谢谢！我再实践一下。