脐血干细胞复苏现象请教

jack1381818

1.首先需適用合容器儲存;袋式'管式( A: @% ~5 q8 B# ~
2.解凍時應浸入液面下避免上下溫度不均
7 @9 L) Z  l- _, o3.融化时时一块一块或还是整个一块缓慢融化與細胞濃稀度及均勻性有關'j' H5 v5 m7 J# [1 H" `$ `
所以依據實驗去解凍只會有快慢差異影響活性'無法依好壞為判定依據' 以上說明
* P  q# p7 T/ M8 Q8 ]7 M

jack1381818

复苏时去掉铁盒子比较好

jack1381818

脐带血复苏后没有明显的分成，离心也离不出单个核细胞。+ C7 e+ U& l- m, U" R
建議: 1.解凍後的細胞懸浮液加入PBS以稀釋DMSO的毒性。再離心
6 B- o! X+ E  ]: r  v7 @8 l, Z          2.量太少而不足以稀釋DMSO的毒性及離心時分層。3 z$ q4 w* C: I

jack1381818

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5 Q/ N6 z& ^0 A" g* P: }; ^* u% n, V) _* i8 L) R, P
收到'感謝! Y. y) P, l/ j

jack1381818

建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性7 ^& P$ i5 U8 h$ S
裸眼看不準

jack1381818

回复 deshenglll 的帖子0 ~7 R0 d8 X; B" }0 n

5 R4 {7 m6 F# c建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性
# S& q0 K! A% z: a2 P: t* i1 }裸眼看不準

jack1381818

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* _! p) E9 i! J1 s" D; g2 _( G9 w' i! f4 P9 r
建議加入CD34、CD45、7-AAD、标本一起加的孵育10min后立即上流式机检测，结果测出的细胞活性裸眼看不準

jack1381818

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6 P# ?; e. A- H& Y5 Z
( h5 R+ g5 F2 h# a建議
4 S( r& S' X: P& Z1.你可改用15ML小管以300G離心5-10分' 理論會比50ML管好" @, J' Q; T1 `0 T4 K! Z  t$ o
2.紅血球lysis的處理；若細胞或組織有脂肪團塊的干擾，建議多用幾次40 μm filter進行過濾以排除干擾。
3 Z4 s! }# {  N9 p4 g3.改用使用磁珠系統的原理就是搭配不同的單株抗體或多株抗體標定於磁珠上，再用此磁珠來挑出目標細胞