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如何去除细胞碎片 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2013-6-9 09:15 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
去除细胞碎片,一般用的速度和时间分别是多少啊?
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沙发
发表于 2013-6-9 09:51 |只看该作者
一般情况下,可以采用3000-5000转/分,离心5分钟,可使细胞碎片沉淀下来,取上清液即可。
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藤椅
发表于 2013-6-9 11:10 |只看该作者
回复 素心无痕 的帖子# i) \# R$ u. n( M" \  L

$ L, o8 |# f' s6 Y& V3000-5000rpm细胞不是也随沉淀一起沉下去了嘛?

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板凳
发表于 2013-6-9 12:28 |只看该作者
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自然沉降20min
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报纸
发表于 2013-6-9 20:56 |只看该作者
素心无痕 发表于 2013-6-9 09:51
  t5 I" Y: l! _9 ^2 f- h一般情况下,可以采用3000-5000转/分,离心5分钟,可使细胞碎片沉淀下来,取上清液即可。
" i! @/ O3 z9 @
这个速度细胞都碎了,全变碎片沉下去了。安全速度是不超过2000RPM
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地板
发表于 2013-6-9 21:00 |只看该作者
回复 素心无痕 的帖子) S% n/ _. ~: [* v
8 @6 \; R- E& l$ g% g7 @
这么高的转速,还要你的细胞不?细胞都成碎片了。
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发表于 2013-6-12 22:27 |只看该作者
低速500rpm左右 短时 2-3min
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发表于 2013-6-13 10:43 |只看该作者
感谢战友们的批评指正。其实如何去除细胞碎片还是靠个人经验总结,比较常用的方法有1.自然沉降法,将细胞悬液置于离心管中,等细胞大部分下沉后,吸弃上清,如此反复多次,也可到达目的,但是还是会有少量的残留;2.离心法,转速<300-500g,5min,但是还是要根据不同的细胞类型来决定。当然也有人提出使用稀释法,不过本人没有做过。谢谢大家!
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发表于 2013-6-14 10:47 |只看该作者
300-500G?看不同的机器,这个转速是高的相当于1200-1500rpm左右,上面有位朋友说的是500rpm不是g哦!这是低转速,能够使碎片下沉但细胞还沉不下来。
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发表于 2013-6-14 16:38 |只看该作者
回复 evial 的帖子
- t) E- L% F% G' Q+ ]
3 I* P$ Q; u' [7 h是的,300g我试过,相当于1200-1300rpm,这个转速肯定是不行的,500rpm,没试过。请问你们一般用多少的转速和时间啊
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