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PBMC掺杂红细胞会如何   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-6-25 08:32 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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在吸白膜层的时候吸入过多的红细胞,在培养的过程中会遇到什么样的情况呢?因为脐血红细胞很轻,比较难彻底的分离,有时会掺杂较多的红细胞,大家遇到过没有
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沙发
发表于 2013-6-25 11:06 |只看该作者
如果掺杂少量红细胞,是没问题的,不影响到白细胞的分裂和增殖,到一定的时候,红细胞自行裂解,最后收细胞的时候没有什么红细胞了
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藤椅
发表于 2013-6-25 11:17 |只看该作者
回复 流泪的鱼 的帖子  E" V8 d. Z5 ?+ t, u/ P" m5 l, b
; e1 J' y* W8 [2 B5 a7 w8 Z5 r6 Q: N0 j
要是参杂太多呢

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板凳
发表于 2013-6-25 12:38 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子# A! I/ n6 t5 ?9 K. W/ M

8 c5 I3 n2 c" M: Y! A0 d' \% J你可以用红细胞裂解液去除红细胞
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报纸
发表于 2013-6-25 14:32 |只看该作者
回复 yaolinzhang 的帖子
! ~' {$ L& u$ N" m: R# }2 p' Y. Z. a* O+ ~9 z' \7 c
我想知道的是,过多的红细胞对PBMC培养的影响。

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地板
发表于 2013-6-25 15:12 |只看该作者
回复 easternliu 的帖子
; W) j* y1 K" D' ]( C  G7 h" X; L7 O2 {
同意流泪的鱼的观点,“影响不大”,可能会干扰计数
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7楼
发表于 2013-6-25 15:14 |只看该作者
红细胞太多,用显微镜不易观察,据我们的经验,对PBMC的生长影响不利
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8楼
发表于 2013-6-25 15:27 |只看该作者
红细胞过多,对单核细胞的生长肯定存在影响的,与生存空间都有竞争关系,最好是进行优化分离液和离心参数,我用FICOLL分离脐血,有些标本本身就是容易白膜层混有红细胞。
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9楼
发表于 2013-6-25 15:53 |只看该作者
回复 小公 的帖子
, c' n4 b! I: n& C; D9 N" i- m- Q( Q& M  k1 A
是的呢,这正是我现在面临的问题,你们离心力大概多少G呢,应该适当提高离心转速吧。混入红细胞后,是否会引起细胞的粘连呢
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10楼
发表于 2013-6-25 17:11 |只看该作者
如果红细胞比较多,用裂解液裂解一下,掌控好裂解尺度。如果红细胞少,就没必要管它,它会自行裂解掉的。
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