我的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞怎么了？ - 间充质干细胞专区干细胞之家



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星火燎原3562

新手上路

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楼主

发表于 2013-6-30 19:36 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

P1代细胞Wistar大鼠骨髓间充质干细胞，自己分离的，P0代长了20多天，传代后就这样了
培养基：DMEM+10%FBS ，FBS是天津TBD的，好多天了长得特别慢！是不是老化了啊？该怎么办呢

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沙发

发表于 2013-6-30 20:36 |只看该作者

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这是传代后几天的照片？看细胞状态确实有点老化了，感觉像缺营养物质。这次传代后中间换过液吗？建议再传代看下，密度和这个差不多就行。2-3天后，不论细胞长的如何也换次液，观察看看是否能挽救过来。

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liuyul03

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藤椅

发表于 2013-6-30 23:50 |只看该作者

细胞老化了，原代长的时间太长。救过来的可能性很小了，重新做吧。

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light_blue

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板凳

发表于 2013-7-1 09:19 |只看该作者

建议更换进口血清试试，原代时间不能太长，生长过慢可能有细菌污染。

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aulenuyah

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报纸

发表于 2013-7-1 09:23 |只看该作者

个人觉得细胞老化了，传代救过来很难了，建议抓紧时间重做吧

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xld1984

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地板

发表于 2013-7-1 13:07 |只看该作者

细胞老化了，不知你P0代是消化的还是种植的，时间太长了

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星火燎原3562

新手上路

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7楼

发表于 2013-7-1 18:58 |只看该作者

P0自己分离的，从分离到长满瓶底

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希望之光

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8楼

发表于 2013-7-2 09:00 |只看该作者

首先，P0代的细胞不能长太久，20天原地不动对细胞是很不利。这一点对你后面养细胞的活力影响很大。其次，传代时要尽可能降低对细胞的损伤，如果是用胰酶的话越低越好，我都用0.05%的，但文献里有用0.025的。如果细胞养老的话用这个浓度就很难消化下来了。从你现在提供的图片来看，你就收了做检测吧！养不好了。记住养细胞的关键就是：一直给它吃好喝好照顾好，丁点损伤都不行，不能抱有侥幸心理。