讨论一下影响精原干细胞self-renewal和differentiated的机制以及还有什么研究潜力？

20111109

如题，望各位战友不吝赐教。交流中，摩擦科研火花~~

jhu132llh

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9 c" e+ o% b: X- G# Q1 T" b% z3 R: W& U$ V  b7 _" ?& v
个人觉得还是有点悬% u' Z# ~, }; X7 ?
因为没有后续了9 ]) u5 r' ?2 X" a; G, N
这个平台如果是很好用的话0 ]) s( w* q; u3 u8 X! a
应该后续会有很多paper出来的
( T5 _! Z: w4 ?3 H! Q结果后面再也没有后文了
" z1 g4 W! b' b4 t0 D- ]+ _所以，我觉得很悬
3 ]! e8 E' r6 n2 ?9 \: U+ n; ?8 g不过，这些都是个人观点，纯属猜测，没有任何依据

w343989328

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) _+ k0 e4 c% @% l% u+ P
7 S/ C$ @5 E7 |4 Q. x, q. w哦哦，谢谢！我也很关注这篇文章，也是一直找不到后续。他分离的是A型细胞，看形态确定不了是SSC，标尺都没有。不知道在SSC中转TERT会怎么样。

jhu132llh

回复 w343989328 的帖子8 d3 a9 W3 R  y  G9 Q, R
. |! h- g$ w7 |- P  T
冯立新2002年的那篇science就是hTERT转染小鼠SSC后建成小鼠永生化细胞系可以完成减数分裂得到精子，只是后面就没有后续了

w343989328

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% N) M; f9 J6 E
5 P( `. w: P9 k0 c" z& f版主，有SSC永生化之后成功移植产生精子的报道么？

biovictor

       对待SSCs，在下倒是有一些不同的看法，就我看来，SSCs 的增殖不是问题，因为人类每天都要产生45-200 million个精子，如果SSCs真的增殖很慢的话，光靠后面的精母细胞来分裂，是达不到如此数目的更新的，也就不能维持干细胞库的稳定了。另外，对于SSCs筛选，虽然没有一个明确的标记来指明某某细胞就是SSCs，但是我们可以通过阴阳性双结合的筛选方法来尽量筛选出SSCs群体（eg，THY1 positive and CD117 negative selection），只不过筛选出来的SSCs需要移植或长期培养鉴定罢了。最为重要的是，SSCs长期培养会有去分化现象，形成类似于胚胎干细胞样的细胞类型（克隆密集，细胞变小等），而此类细胞再移植回裸鼠体内时，通常不会继续分化为精子，反而形成畸胎瘤，所以，长期培养的SSCs已经不能识别体内环境给予的信号刺激，估计他已经不是当初的SSCs了。如果能够找出为什么产生此类现象，或者细胞内部发生了什么变化，估计会有很大的突破吧！

jhu132llh

随着环境污染及生活压力引起的癌症及生殖异常的患病率越来越高
" ?7 p/ R' t. E% n! P这一点，从各地生殖中心和精子库的生意异常火爆就可以看出来% f) Z2 c/ j7 X% _5 Y5 ?
其实SSC的研究就迎来一个百年难遇的机遇+ _- i- h9 x: F' f
但是$ \4 {! o% J9 _9 f
很多问题困扰着SSC的发展. A: C' q& D  U) [. t
首先，SSC的特异性marker尤其是特异性表面分子标志就是一个首当其冲，不可忽视的问题$ I7 `' V' P5 x, A- T4 t, _
基本上SSC表达的表面分子标志在睾丸中间质细胞中也表达
  g3 _: {8 ?. k; s5 u剩下几个不在细胞膜表面表达
) v+ i' O' t* I( E+ A$ d* @1 m这就带来一个最头疼的问题
0 [9 v4 `9 f9 x5 h- }/ `如何分选SSC，目前比较常用的是差速贴壁结合FACS OR MACS: z3 @# L4 B. z# q( v- k% P
但是这些带来的问题是细胞活性活力会有很大的影响，如何分选得到既高纯度又高活性的SSC现在还没有一个特别好的方法；# W; h5 u* y  ~9 D: f! a# a& R
其次，简单可行的培养体系$ T9 g  G0 t9 ?! ?) e7 z
目前，SSC的培养体系大多是shinohara体系或优化，体系大多异常复杂，不如ES和IPS体系简单% b( z0 }1 r2 {' h9 H! |
此外，SSC体外维持大多需要饲养层细胞，将来要应用到临床的时候如何排除饲养层污染也是一个问题& Y5 r! p" @) ~1 @$ c
所以，一个成分明确简单，培养条件简单可行的培养体系亟不可待; S& y# }; K/ C% @, _& U
再次，细胞数目' k. a3 ~  D- i) s' x
众所周知，SSC的体内增殖是很慢的，他在体外增殖也是很慢的
# f: P5 V' w3 N% I) g, `$ \9 M0 h, @那么，用于SSC体外各种机制的研究需要大量的SSC，这些SSC从哪里来是个大问题
  T, {/ r; j; E0 m# E4 _3 ]7 ]所以，一个能拿出来供全世界科学家研究的SSC细胞系也是迫不及待的
" n3 T( a5 u( L7 G6 @2 {虽然有几个小鼠SSC永生化细胞系建立的文献见报道，但是，这些细胞系似乎没有特别充足的证据表明他们就是SSC细胞系，或者他们能输入小鼠睾丸中能重建精子发生，那么这些细胞系都得不到大家的公认，他们也就失去的研究的价值2 {4 `; e4 |; Y
假如有朝一日能解决以上3大问题，我相信SSC的研究就会从模式动物向临床应用往前跨一步。
" c/ f+ e2 A  D5 g; u% ?( k$ [; |

CHYY

终于见到SSC的了，激动一下，大家继续聊，别沉了！

w343989328

- Q& a2 l# O  y0 q: ]
/ `4 ~. j7 |2 I; R2 Q由IPS之后，再到MEF诱导为NSC，再到MEF to HSC，我觉得诱导到MEF to SSC应该也是可以期待的一个project，并且能够说明SSC的self-renewal的一些问题。至于小分子，我觉得是一个比较漫长的过程了。IPS也是从逆转录病毒，再到腺病毒，然后是丁胜的单因子，现在是邓宏魁的小分子，是一个循环渐进的过程。3 e& z6 n+ W2 q; F) ]" |+ j
其次，真正的体外分化模型并没有做出来，分化的表型未出，讨论机制为时尚早。2002年science报道过用端粒酶组分tert转染A型精原细胞，成功在体外分化。我一直在追踪这篇文章，但并没有发现后续的发展。

490096812

回复 20111109 的帖子. X- U4 s* u1 G) I+ v4 \0 ^$ t6 |
9 G: u+ L: a: R2 u
很有潜力的。你可以参考最新邓院士的那篇文献，用小分子物质诱导成IPS引起轰动。如果可以拜托用基因改造建立精原细胞系，或者是采用小分子物质进行精原干细胞的诱导分化，都是谢很有意义的工作。（前提是经费充足）