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讨论一下影响精原干细胞self-renewal和differentiated的机制以及还有什么研究潜力? [复制链接]

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楼主
发表于 2013-7-25 09:05 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
如题,望各位战友不吝赐教。交流中,摩擦科研火花~~

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沙发
发表于 2013-7-25 10:35 |只看该作者
本帖最后由 20111109 于 2013-7-25 10:46 编辑 4 a* ~5 |0 {8 Z: y: B
8 y- |9 _1 p- f6 K2 |
首先,我知道的精原干细胞更新和分化的调控主要是干细胞的微环境niche,niche中其主要作用的还是sertoli,我们现在所知的sertoli分泌GDNF、FGF2等因子可以促进SSCs对自身stem特性的维持。  E2 Z2 q+ @; k5 Z8 D2 E
还有,最近一系列关于miRNA regulate SSCs undifferentiated state 的文章。brinster的microRNA 221 and 222,martin dym的miRNA 20 and 106a,文章附在附件中。
, a; t5 l# {( E' s4 J, N1 R' g, u0 F6 H. F* f0 }- @' u
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藤椅
发表于 2013-7-27 11:56 |只看该作者
,有  比较好的SSCs分离培养 建系  诱导分化 的protocol  分享下,谢谢。。学习学习

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板凳
发表于 2013-7-29 08:33 |只看该作者
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本帖最后由 20111109 于 2013-7-29 08:34 编辑
; Z* t, i( J; e: x# f3 \
0 A- _6 h; m. ^% X2 Y回复 POPOLD 的帖子
3 z8 g! Q9 y& O4 K; O
! x6 Z" O8 t! U建系的我们使用的是这个:
2 o/ B; I, l+ c$ {9 y2 a/ b3 V4 ^! q3 ~( f3 D
1 o' _/ A- |, H. Q- s

% {8 E5 e% F5 X) Tshinohara 的体系
! `6 I. b8 q% A6 E6 U) M- L0 i7 T! p
诱导分化的文章没有,如果您找到了,希望您能与我共享~~(*^__^*) 嘻嘻……
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报纸
发表于 2013-7-29 08:35 |只看该作者
大家觉得小分子肽类在精原干细胞中的研究潜力如何?

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地板
发表于 2013-7-29 08:36 |只看该作者
大家觉得小分子肽类在精原干细胞中的研究潜力如何?

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发表于 2013-8-1 14:08 |只看该作者
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- a, p- H* s0 f5 W
9 X0 r9 b; J/ t) V( F- I很有潜力的。你可以参考最新邓院士的那篇文献,用小分子物质诱导成IPS引起轰动。如果可以拜托用基因改造建立精原细胞系,或者是采用小分子物质进行精原干细胞的诱导分化,都是谢很有意义的工作。(前提是经费充足)
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金话筒 优秀会员

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发表于 2013-8-1 22:28 |只看该作者
本帖最后由 w343989328 于 2013-8-1 22:29 编辑   q! I5 [/ W& V6 ~

, |: G5 K' L  U, I6 g由IPS之后,再到MEF诱导为NSC,再到MEF to HSC,我觉得诱导到MEF to SSC应该也是可以期待的一个project,并且能够说明SSC的self-renewal的一些问题。至于小分子,我觉得是一个比较漫长的过程了。IPS也是从逆转录病毒,再到腺病毒,然后是丁胜的单因子,现在是邓宏魁的小分子,是一个循环渐进的过程。, D" N+ {2 r6 S, h
其次,真正的体外分化模型并没有做出来,分化的表型未出,讨论机制为时尚早。2002年science报道过用端粒酶组分tert转染A型精原细胞,成功在体外分化。我一直在追踪这篇文章,但并没有发现后续的发展。
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发表于 2013-8-1 22:32 |只看该作者
终于见到SSC的了,激动一下,大家继续聊,别沉了!

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10
发表于 2013-8-2 23:38 |只看该作者
随着环境污染及生活压力引起的癌症及生殖异常的患病率越来越高
' R: O1 k$ c2 E这一点,从各地生殖中心和精子库的生意异常火爆就可以看出来
, X/ ~& @$ @$ I* x$ i" B9 G其实SSC的研究就迎来一个百年难遇的机遇
0 I( Z/ r' M  b3 O# F9 Z但是- T2 ~2 T1 z; J! z
很多问题困扰着SSC的发展
$ a; w1 \' F6 q! j首先,SSC的特异性marker尤其是特异性表面分子标志就是一个首当其冲,不可忽视的问题9 v, z* t% C- v
基本上SSC表达的表面分子标志在睾丸中间质细胞中也表达5 g5 i4 s- e( F2 |! d
剩下几个不在细胞膜表面表达
" Q" W0 H& r8 R5 B8 B. L: N! }( x这就带来一个最头疼的问题
2 v1 k! x  p8 V如何分选SSC,目前比较常用的是差速贴壁结合FACS OR MACS# Q2 n$ B4 S0 P: I7 `* i. R
但是这些带来的问题是细胞活性活力会有很大的影响,如何分选得到既高纯度又高活性的SSC现在还没有一个特别好的方法;
" j' o& R* b' s4 Q2 m其次,简单可行的培养体系. u: F4 j" v" D/ |
目前,SSC的培养体系大多是shinohara体系或优化,体系大多异常复杂,不如ES和IPS体系简单% L2 X# x- _  e& p# |/ u5 K
此外,SSC体外维持大多需要饲养层细胞,将来要应用到临床的时候如何排除饲养层污染也是一个问题& Z. z. a* z* e' D
所以,一个成分明确简单,培养条件简单可行的培养体系亟不可待# X% Q. I. c* z
再次,细胞数目
7 ^) G5 o+ z; w$ ]* |众所周知,SSC的体内增殖是很慢的,他在体外增殖也是很慢的
/ X- B% p1 P$ I那么,用于SSC体外各种机制的研究需要大量的SSC,这些SSC从哪里来是个大问题5 f2 m6 o' q- D- I0 J1 i5 U5 R: ^
所以,一个能拿出来供全世界科学家研究的SSC细胞系也是迫不及待的, f3 q1 i4 I5 b
虽然有几个小鼠SSC永生化细胞系建立的文献见报道,但是,这些细胞系似乎没有特别充足的证据表明他们就是SSC细胞系,或者他们能输入小鼠睾丸中能重建精子发生,那么这些细胞系都得不到大家的公认,他们也就失去的研究的价值: P. z/ u: l. n' Z- H
假如有朝一日能解决以上3大问题,我相信SSC的研究就会从模式动物向临床应用往前跨一步。
/ d+ r  ]0 L: b$ Q
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