CIK培养加液时机问题！！！

lyj-0017

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你说的很有道理，细胞培养是一个动态过程，如果不经过严格的指标监控，初期也只能通过经验进行补液。你说的“细胞密度太低时，细胞反而生长不良”，这种现象也确实遇到过，细胞初期长得不错，加液之后感觉细胞很稀，后期就不怎么长了，这也是个教训吧。% Y1 i7 s: B8 e" o
那你们是如何加液的呢？加液之前先取样计数再加吗？细胞密度应该多少为宜呢？5 g2 w- L+ n: D+ U
多谢了！

jiefengbing

回复 lyj-0017 的帖子  E7 N$ T6 |2 F) q; C: h% ?6 \9 i' K
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你说的细胞数量降低是指去除了诱导DC的那部分吗？

xu_shufen

在细胞培养袋中培养CIK细胞如何补液：淋巴细胞在细胞因子作用下，进行增殖、分裂，同时消耗培养基中的养份，代谢出许多废物（比如CO2）。另外也分泌出许多细胞因子，这些细胞因子也有对细胞增殖、分化有益的，所以补液时要根据细胞的密度，要观察培养液的PH，当细胞密度超过一定数量后，培养液变酸，不利细胞生长。所说几天补液，只是许多做过CIK细胞的经验说法，真正培养细胞要测定细胞密度，经验多了以后也可肉眼观察。另外培养液中大多有酚红，也可通过观察培养液的颜色进行补液。还有并不是营养越多越妈，当细胞密度太低时细胞反面生长状态不良，这里也细胞和细胞之间、自分泌、旁分泌作用。

lyj-0017

回复 cjsbaicai 的帖子  D7 V; O# t, g1 R- @
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比如加入袋子的细胞密度为1.0x10^6/ml，到第三或者四天时，细胞密度应该有所降低吧？这时如果加液的话，细胞密度不就更低了吗？细胞后期还能长得那么好吗？& U1 c" m# W7 N2 A9 V
另外，你说的隔天补液，比如今天上午9点补的，那下次应该到明天上午9点补，是这样吗？4 ?/ t! J2 s1 m5 V! E- R7 Y
多谢啦~

cjsbaicai

说是第三天，实际一般是隔天补液。培养袋一般都配有取样口，和补液孔是分开的，口头有橡胶塞封住。取样和补液时注意酒精棉擦拭或者酒精灯附近操作就行