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arneyda

新手上路

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楼主

发表于 2013-8-14 22:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些

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fguw

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沙发

发表于 2013-8-14 22:45 |只看该作者

最可能的有2种原因，第一，转染效率太低，2，载体有问题，

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neuralstem

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藤椅

发表于 2013-8-15 00:12 |只看该作者

promoter太弱。 CMV在干细胞里不表达或者活性低很正常

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板凳

发表于 2013-8-15 10:04 |只看该作者

同意楼上启动子选择不当的意见。在干细胞中建议使用CAG、EF1a启动子，不要使用CMV。GFP建议使用亮度更高的Venus等替换。

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fguw

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报纸

发表于 2013-8-16 08:09 |只看该作者

似乎楼上都是做人胚胎干的？
首先需要了解是什么干细胞？有文献支持？7 k, Y" _0 a! d9 m9 X" j+ u1 B$ a2 l
载体，是不是对？有gfp吗？载体在其他细胞中验证过？' G5 I2 X# c! ^' r* u2 m; ^; K
转染效率肯定没有问题？, t! n2 [+ M1 S
这些都是需要在做实验前先了解的9 M$ z# M$ \- v3 U9 O9 G* ?$ w9 `