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[请教] 转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些 [复制链接]

arneyda

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包包
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楼主
发表于 2013-8-14 22:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
转染到干细胞后，GFP检测不到，原因有哪些
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fguw

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沙发
发表于 2013-8-14 22:45 |只看该作者
最可能的有2种原因，第一，转染效率太低，2，载体有问题，
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neuralstem

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藤椅
发表于 2013-8-15 00:12 |只看该作者
promoter太弱。 CMV在干细胞里不表达或者活性低很正常
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username

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专家 优秀会员 金话筒

板凳
发表于 2013-8-15 10:04 |只看该作者
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同意楼上启动子选择不当的意见。在干细胞中建议使用CAG、EF1a启动子，不要使用CMV。GFP建议使用亮度更高的Venus等替换。
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fguw

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金话筒 优秀会员

报纸
发表于 2013-8-16 08:09 |只看该作者
似乎楼上都是做人胚胎干的？
  D1 x3 r) ?7 ?" l首先需要了解是什么干细胞？有文献支持？' y; T% I% @$ M
载体，是不是对？有gfp吗？ 载体在其他细胞中验证过？+ Z0 m; c8 P$ ]! @8 W8 q
转染效率肯定没有问题？
) p3 b1 _7 b' z( q% B( f$ d这些都是需要在做实验前先了解的
* S1 j( N2 \& c% c# b3 m! L
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mickey56

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地板
发表于 2013-8-16 15:32 |只看该作者
同意楼上几位的意见，我觉得更多的原因要找找看启动子。
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