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脐带组织贴壁要多久传代 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-8-20 16:26 |显示全部帖子
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1、原代组织贴壁法从原代分离培养到细胞传代一般12天到14天就可以了,但这个还是会因人而异的,所以从11天到20天都有可能的,我一般是根据自己要传代的比例来选择细胞传代的融合度(密度),如果是按一比二比例进行传代的话,会在细胞融合度达到40%到50%就进行传代。
1 t* t; W5 Q; H2、10cm的皿要加2ML胰酶-EDTA就可以了,一般采用0.05%的胰酶,有时也用0.25%的胰酶,我想在这两个浓度之间都可以吧,自己可以适当调整,关键是终止胰酶消化的时间要掌握好,看到有80%左右的细胞脱落就马上终止,0.25%的胰酶消化时间会快一些。+ p) P& l5 e4 K2 H# {1 V: Z0 v- n
3、离心力一般采用1000rpm,10min。
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