如何选择恰当的细胞分选柱

miltenyi

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美天旎的分选柱分几类，如MS、LS、LD级autoMACS column 等，那么，这些有什么区别呢，您在实验中又该如何去选择适合您的分选柱呢？
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首先，让我们来认识一下分选柱：( F, @# I/ v( ~0 ~
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美天旎的分选柱（Column）是MACS技术的核心，其特点如下：9 `# j% [7 N# M! X# `! O% b! J  H

• 填充有不同规格的铁珠，可分选或者去除10^7-10^10细胞；9 Q9 R3 M" z: ~
  
•     表面亲水包被，不损伤细胞，同时保证流速；. x( W" n5 Q9 F: u: R
  
•     可以将磁场放大1000-10000倍，因此只需极少的细胞表位被识别即可被磁场捕获，从而为后续实验预留足够抗原表位，如磁珠分选后的细胞无需切除磁珠即可直接染流式抗体，而不受影响。
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我们知道，美天旎的MACS分选策略有阳性分选、去除分选，那我们就按两种分选策略来分析如何选择恰当的分选柱：8 _& E  @1 q/ }* b: P( `' x
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一、阳性分选
0 g* }' ], E7 S, B! ]2 X1、要分选的细胞数量：' H5 d% G0 U$ N" [2 B  @
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如下图所示：MS柱容纳的最大细胞上样量是2×10^8细胞（既包含阳性细胞又包含阴性细胞），而其能捕获的阳性细胞最多是10^7。
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如何选择恰当的细胞分选柱8 ^0 `' \) R! E6 Y
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2、目的细胞是常见细胞还是稀有细胞
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为了在分选稀有细胞（表达频率〈5%）时得到较更高的纯度，您可以使用两个分选柱：用一根分选柱进行一次分选后，阳性成份再过一次新的分选柱。, Z# V: z. c- z2 @/ i

+ @8 l: z) w* [- ?, l. F+ ]3、大体积的细胞' S" B1 r; i' y$ w, x$ d$ n
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另外，如果您要分选的目的细胞是体积较大的特殊细胞，如原生动物细胞、人皮肤郎罕式细胞、鼻咽癌细胞、心肌细胞等，那推荐您使用Large cell column。因为大细胞柱的铁珠间隙足够大，容许这些特殊的大体积细胞顺利通过。
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8 v: d2 Y" A# M二、去除分选
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) j8 ?) a2 `# o! r% X; ]  S0 C- }去除分选中需要考虑以下几个因素：& `! M8 s' n* u9 w! q; b& E, j

3 v3 a1 {& l2 u' Q  `' G1 您使用MACS isolation kits 或MACS microbeads吗？7 F1 w, d. Y/ O% }+ x2 ^  f# c+ q
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2 抗原表达强还是弱呢？
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: |* k, {+ [# S& [* p' Q3 您需要更高的纯度还是回收率呢？
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# C2 D" N# F9 A4 您需要分选多少细胞？
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根据这几个因素，您可以按下图的标识来选择合适的去除分选柱。6 A! S/ H! n& j  m7 `( k
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以上，您知道如何选择分选柱了吗？1 v6 X* T% V5 ?: J

8 N2 ^- N3 G9 |/ o9 w* A如有疑问，您可以拨打800-820-26062 o$ [1 T* y4 Q. ~( w
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或者发邮件macs@miltenyibiotec.com.cn 咨询。

yuanshenyewu

MS用的还是多一点