CIK细胞培养疑问

xiangbalao

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3，IL-2，IL-1好像没起到作用，
0 B) K% Y# M8 q+ w一直贴壁，吹不下来。而且，加完因子后没有细胞克隆团产生。1 j% Z+ ^6 t0 }! V% G& F3 D
还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，这会是什么原因？

yinfuhua

回复 xiangbalao 的帖子; M' X  n( C% G( T5 X" X$ I6 `

- a# R7 J3 ?" X4 F# [9 E! X先检查一下培养液，是否为培养悬浮细胞的；再看下细胞因子（进口、国产、因子浓度配制是否合适），对每种因子都要查验。另外，要检查一下培养体系是否有问题。一般来说，培养18-24h应该可以看到克隆团了。

孙帅帅

你是怎么取的单个核细胞？用的是健康人的外周血吗？还是脐血？培养基 使用的什么培养基啊？

xiangbalao

脐血，ficoll离心，培养基 vivo

大少爷

应该是因子的问题吧

xiangbalao

在线急等，哪位大侠碰到过这种情况，帮忙具体分析分析。。。

meister

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! ?7 ~2 E1 e4 N: E4 H4 R! d4 \( x
最大可能是抗体出问题了。- A. E! z8 i6 d
次之IL-2的问题。
* s/ x. V7 X( t2 f其他原因可能比较小。
, j  Y% |; n5 C3 K! X1 V7 H3 B! }

淡定的摩羯

建议做一下支原体检测% L6 c- \% C5 o* _3 }. x

xiangbalao

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5 N/ ^9 J% G' `0 y- G) B0 g1 T$ W- {( z- q
抗体？

沙漠狐o0

请问培养基中为何要加IL-1呢？' Q' Z* l/ c( R# ^4 v3 I/ O( j: f
培养基中添加因子浓度对了么？CD3、IL-2的浓度有没有弄错？