CIK细胞培养疑问

xiangbalao

最近养CIK细胞，细胞总是贴壁，悬浮细胞也少，加入CD3，IL-2，IL-1好像没起到作用，$ p3 N" @: G5 ?5 e3 E; V
一直贴壁，吹不下来。而且，加完因子后没有细胞克隆团产生。% Z3 F6 }5 ]. D9 y
还有一种情况是细胞一直不会扩增，养着养着就会凋亡，这会是什么原因？

yinfuhua

回复 xiangbalao 的帖子# [$ m* ^) x; A. w

2 w" Q' u- K, j8 G. k先检查一下培养液，是否为培养悬浮细胞的；再看下细胞因子（进口、国产、因子浓度配制是否合适），对每种因子都要查验。另外，要检查一下培养体系是否有问题。一般来说，培养18-24h应该可以看到克隆团了。

孙帅帅

你是怎么取的单个核细胞？用的是健康人的外周血吗？还是脐血？培养基 使用的什么培养基啊？

xiangbalao

脐血，ficoll离心，培养基 vivo

大少爷

应该是因子的问题吧

xiangbalao

在线急等，哪位大侠碰到过这种情况，帮忙具体分析分析。。。

meister

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8 U" y# W" Y4 b' p1 O8 d! m+ i7 f' T- H
/ i2 g+ m$ C' y1 L1 B9 ^% f6 v最大可能是抗体出问题了。0 N5 }8 y# g5 [6 U
次之IL-2的问题。' ]: u/ |7 \$ Y7 v/ w
其他原因可能比较小。9 h) T2 k4 t6 b; A# F

淡定的摩羯

建议做一下支原体检测
: p3 c$ g8 d7 p

xiangbalao

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2 x: m$ C/ L, b; d6 T5 k, a! J抗体？

沙漠狐o0

请问培养基中为何要加IL-1呢？
9 D5 Q! |  @9 u* {% X. r) n培养基中添加因子浓度对了么？CD3、IL-2的浓度有没有弄错？