请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急

qiushuiwuhen

如题，请教各位战友关于HESC的冷冻protocal,之前的冷冻用的是10%DMSO+40%SR+50%培养基，问题是：解冻后的克隆几乎全部死掉，不管是在feederfree还是feeder-dependent的情况下，长势均不良好，请教各位冷冻解冻的经验，如能分享protocal更不胜感激。

qiushuiwuhen

回复 希望之光 的帖子
9 S9 W$ x+ ]1 J! f# B7 i
+ V& B8 u9 e$ [) i6 A我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

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4 y! f/ Z# `% l, R; l
8 P8 ~% u) O+ R+ `8 q& I' T  i我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

回复 xuyang0317 的帖子
4 S* p8 X0 ^8 U. w) L3 x* b* Z7 i# ?( f/ F
能否请教你冷冻液的配比是多少，细胞的复苏率高吗，另外冷冻液中HES培养基是否还需要加bFGF?谢谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子5 Z2 j2 l( R. X3 `
2 Q- \# D, u2 i" A; q2 a
十分感谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子+ a1 a2 @% i. }4 Y6 F
* e$ z- V$ h! p! c7 F, l' d# f
十分感谢

qiushuiwuhen

回复 孙帅帅 的帖子2 `. K7 W- B4 z) r0 q& Z7 J
8 D8 N+ J  Z* m' {6 T: A+ z/ _
之前看一片nature protocal，说的是冷冻IPS用的就是10%ＤＭＳＯ＋９０％　ＦＢＳ，ＦＢＳ可以换成ＳＲ，但是比较证明克隆复苏率的情况，ＦＢＳ优于ＳＲ，准备下次试试，谢谢

qiushuiwuhen

回复 waterbubble 的帖子
7 i* C( |  J4 k
- f0 z# ?) W; ?7 O) A: MＣＳ１０是何东东，没有听说过呀，是成品的冷冻液吗，并且终浓度１０ｕｍ是指的谁？谢谢