请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急

qiushuiwuhen

如题，请教各位战友关于HESC的冷冻protocal,之前的冷冻用的是10%DMSO+40%SR+50%培养基，问题是：解冻后的克隆几乎全部死掉，不管是在feederfree还是feeder-dependent的情况下，长势均不良好，请教各位冷冻解冻的经验，如能分享protocal更不胜感激。

qiushuiwuhen

回复 希望之光 的帖子9 m7 p% M6 L1 I

5 O* S+ \* B6 G/ U8 z% O; y我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

回复 希望之光 的帖子
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* J- ]. I( ^5 c* p8 d我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

回复 xuyang0317 的帖子
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; v' q; v" ]; Z' F# D, a" n能否请教你冷冻液的配比是多少，细胞的复苏率高吗，另外冷冻液中HES培养基是否还需要加bFGF?谢谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子. A# K3 a/ E7 A2 o6 m; T

" I% ?: T5 |- p' s3 Q6 l十分感谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子6 H& ~/ F, J( M- C
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十分感谢

qiushuiwuhen

回复 孙帅帅 的帖子
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之前看一片nature protocal，说的是冷冻IPS用的就是10%ＤＭＳＯ＋９０％　ＦＢＳ，ＦＢＳ可以换成ＳＲ，但是比较证明克隆复苏率的情况，ＦＢＳ优于ＳＲ，准备下次试试，谢谢

qiushuiwuhen

回复 waterbubble 的帖子
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ＣＳ１０是何东东，没有听说过呀，是成品的冷冻液吗，并且终浓度１０ｕｍ是指的谁？谢谢