请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急

qiushuiwuhen

如题，请教各位战友关于HESC的冷冻protocal,之前的冷冻用的是10%DMSO+40%SR+50%培养基，问题是：解冻后的克隆几乎全部死掉，不管是在feederfree还是feeder-dependent的情况下，长势均不良好，请教各位冷冻解冻的经验，如能分享protocal更不胜感激。

qiushuiwuhen

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我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

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# F! d8 J5 t- v! Q4 G9 E. U我算了下，你的比例大概是DMSO：SR：培养基比例是：1:4:5的比例，那副速率高吗，复苏完一般多久能存活，谢谢

qiushuiwuhen

回复 xuyang0317 的帖子0 ~: [: R  J1 s9 j, ^/ ~! C2 E* h
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能否请教你冷冻液的配比是多少，细胞的复苏率高吗，另外冷冻液中HES培养基是否还需要加bFGF?谢谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子/ q0 z6 I& n5 B2 D# s

* K' q# r( @& \+ g) w: c0 r' j十分感谢

qiushuiwuhen

回复 星光灿烂 的帖子$ _) p4 ~7 d6 ]/ R8 W$ M4 o
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十分感谢

qiushuiwuhen

回复 孙帅帅 的帖子' i: J+ \' n) p4 {1 l; V
' L6 x1 E1 ]/ A
之前看一片nature protocal，说的是冷冻IPS用的就是10%ＤＭＳＯ＋９０％　ＦＢＳ，ＦＢＳ可以换成ＳＲ，但是比较证明克隆复苏率的情况，ＦＢＳ优于ＳＲ，准备下次试试，谢谢

qiushuiwuhen

回复 waterbubble 的帖子( Z' @/ ~3 d% U* S$ n

! Q5 J1 n8 e( I/ R- H2 iＣＳ１０是何东东，没有听说过呀，是成品的冷冻液吗，并且终浓度１０ｕｍ是指的谁？谢谢