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楼主: qiushuiwuhen	go 请教hESC的冷冻与解冻protocal,急急急急急急 [复制链接]

希望之光

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楼主

发表于 2013-9-24 22:12 |显示全部帖子

我都是用2X的，就是2ml的DMSO, 6ml的KSR，2ml的DF12。细胞离心后，用培养液以适量体积重悬，之后等体积滴加冻存液。用程序冻存盒冻细胞，第二天移入液氮。如果还不行的话，就在冻存液里加点Y27632，我不加也没事的。复苏常规操作就好了（越快越好）。

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希望之光

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沙发

发表于 2013-9-24 22:25 |显示全部帖子

我都是用2X的，就是2ml的DMSO, 6ml的KSR，2ml的DF12。细胞离心后，用培养液以适量体积重悬，之后等体积滴加冻存液。用程序冻存盒冻细胞，第二天移入液氮。如果还不行的话，就在冻存液里加点Y27632，我不加也没事的。复苏常规操作就好了（越快越好）。

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藤椅

发表于 2013-9-25 18:59 |显示全部帖子

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' ?2 J. n m) i" F: @, l
成活率挺高的呀，主要是操作细节要注意。

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希望之光

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板凳

发表于 2013-9-25 19:00 |显示全部帖子

回复 qiushuiwuhen 的帖子- E, K+ I7 \9 o/ b4 X: M$ f4 j; p. @
; N. K9 ?- _+ K# y
不需要加bFGF，用DF12和20%KSR重悬

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