脐带间充质消化问题

liu3385huan2722

最近细胞出现一个问题，细胞消化的时候成片的掉下来，不像往常一样细胞散开，是什么原因呢？胰酶的问题还是培养基的问题呢？

2420527

是不是细胞融合度太大了

sdudai

消化时间是多长9 z! A( L6 \6 `$ v4 G
胰酶的浓度, v/ ?0 z0 s9 k! q: q; S# }( i
养的什么细胞
/ H, R. Q( M2 `2 n+ G5 T多少代+ [, X. V0 g6 F6 l' E: g
状态如何
$ Z  N) x9 r1 v0 ^还有需要看一下成片掉下来的细胞的活性状态怎么样2 `6 R' O. b0 G+ I

liu3385huan2722

回复 sdudai 的帖子" r, r: l" A; |" W* P

) ^7 m% b1 ]  f0 `3 e( g2 G1-2min* e* F' \7 t: m) I6 q" E4 m
0.25%的胰酶+0.1%EDTA- Q9 F* J6 F: g* I
脐带MSC
( \  U( d$ _' F8 L5 y3 D* U代数不等，有P7代的
7 }5 ]! A, t" x* f# I; A状态还可以
/ B7 t9 h0 O6 g" x6 l9 U掉下来的细胞离心后，重悬，会有絮状的吹不散的细胞团

liu3385huan2722

回复 2420527 的帖子1 ^5 u7 w% k" C* u

9 t* Q6 c& N! R0 P刚刚长满吧。。。融合度还可以。。。

sdudai

絮状是细胞碎片还有细胞内蛋白,离心力要小时间稍长一点，尽量不要用枪尖吹打，可以加点血清维持细胞活性。希望有帮助。6 M; u/ m  Q3 J& ?" e

deshenglll

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. O4 Y- E+ r. n* s) ?4 x) w" C( C# |3 x$ N
是细胞的问题。培养时间过长，在消化的时候容易成片。用吸管多吹打几次，能吹散的就收集，吹不散的就过滤掉。细胞要及时的观察。