脐带间充质消化问题

liu3385huan2722

最近细胞出现一个问题，细胞消化的时候成片的掉下来，不像往常一样细胞散开，是什么原因呢？胰酶的问题还是培养基的问题呢？

2420527

是不是细胞融合度太大了

sdudai

消化时间是多长
$ o2 i5 Y  A' ~! Z5 q+ ~; t胰酶的浓度
- _, R. |( Y" p; P- g1 M7 q, \  S养的什么细胞
' x1 i+ Z! A2 f( w7 t: ^多少代
' I! Y' _5 k9 Y9 F+ Y  o状态如何2 p: k9 _/ V0 Z
还有需要看一下成片掉下来的细胞的活性状态怎么样: f0 E: p& }! k4 c+ l

liu3385huan2722

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! y9 ^7 F9 z8 V9 W7 }3 L3 N  N: n8 ~4 E0 \  {) Y: h% M# t
1-2min( i  Z, K2 j9 x" u8 q; P$ W' t7 |
0.25%的胰酶+0.1%EDTA
' s- n6 L1 ]8 [5 Q5 W) Z脐带MSC) Y0 x- ?0 G& W3 G9 K
代数不等，有P7代的
  d/ v3 f/ {" W状态还可以! T# a+ g) x' r4 n0 E* {5 x$ e1 }
掉下来的细胞离心后，重悬，会有絮状的吹不散的细胞团

liu3385huan2722

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  W( S9 L+ X0 B& [7 k
$ k1 G5 `$ o" f. u刚刚长满吧。。。融合度还可以。。。

sdudai

絮状是细胞碎片还有细胞内蛋白,离心力要小时间稍长一点，尽量不要用枪尖吹打，可以加点血清维持细胞活性。希望有帮助。' A) s* I7 i* A+ [8 x/ O

deshenglll

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8 U  R+ }+ n: n+ n( Z
, m9 ~9 D: x$ O8 ^. d. _是细胞的问题。培养时间过长，在消化的时候容易成片。用吸管多吹打几次，能吹散的就收集，吹不散的就过滤掉。细胞要及时的观察。