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楼主: 大海之家
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CIK细胞培养,出现聚团贴壁!添加小牛血清出现絮状物体。 [复制链接]

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楼主
发表于 2013-11-28 14:13 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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各位朋友们好,小弟近来研究CIK细胞,用的是X-VIVO培养,接种了1-2*106浓度接种,出现大量的细胞克隆贴壁,生长了17天也没散下来,在前期生长较慢,补液间隔一般都在4天,到了15天细胞才长满了瓶底,不过也有大量的克隆集落贴在瓶底上长,一直没散,不知大家有没有遇到此类情况,在第6天添加1%的小牛血清,出现了絮状物,难道血清还有纤维蛋白?希望大家踊跃讨论!
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沙发
发表于 2013-11-29 14:05 |显示全部帖子
回复 lyj-0017 的帖子$ H% T1 a; s: s  }3 g
+ w9 Z$ ?# [! A5 ~* h. U
这次是分了两个浓度培养,一个是1*106,另一个是2*106,低浓度的贴壁的细胞团一直都没散下来,高浓度接种的到了15天慢慢的散下来,细胞增殖加快,细胞密度还行,长得比较圆亮,培养基也黄了许多,低浓度的细胞也有些增长,悬浮的细胞也比较圆亮,就是原来贴壁的团一直都没散,可能是在接种和前期没有添加自体血浆,细胞长得很慢,在15天左右才慢慢长起来,加了两次牛血清,第二天都出现絮状物,应该不是纤维蛋白的问题吧,牛血清是不含有纤维蛋白原,也咨询了技术支持,得到的结论是无血清培养基和牛血清不匹配,但不知道具体是那种原因
1 D; j0 P: A9 x4 `* y
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藤椅
发表于 2013-11-29 14:06 |显示全部帖子
回复 luyue6453 的帖子) Y9 D' N+ W+ p! E
6 i. ]# A/ @, N( [: ]5 c
不加血清或者血浆,那细胞是长得很慢的

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板凳
发表于 2013-12-3 10:52 |显示全部帖子
回复 luyue6453 的帖子+ l) l8 ^0 S: r/ O6 M( w; ]6 [' T
8 M5 r9 w6 r9 c" \6 c5 Q  V# h
我添加的是1%小牛血清,在第6天第一次添加,第二天就有析出,之后又添加了一次,又析出了。你加的是自体血清?是不是经过灭活之后获得的?你讲的加1.5%血浆是不是指没有除去纤维蛋白的还是已经除去了纤维蛋白的?1 C- V5 |3 y( i( d# D* e
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报纸
发表于 2013-12-3 10:54 |显示全部帖子
回复 lyj-0017 的帖子& I5 j& E. y3 q: I/ ]
6 V2 C8 o6 F  n7 b9 i; T( l
是的,不过细胞接种密度合不合适还要看培养方法,像我的这种方法还是2*106每ml比较合适
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地板
发表于 2014-3-31 09:55 |显示全部帖子
要看你的培养体系,接种细胞密度在5*106个每ml到2*106个每ml都可以,一般是1*106个每ml比较合适
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