CD3CD56双阳性细胞流式分析-圈门（附图）！！！

lyj-0017

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3 T5 V# c! H8 E# N# x
1 \  p) c2 ~1 c5 p: V恩，非常感谢。但是，分离出的单个核细胞首次加入培养瓶中进行贴壁，贴壁完成后的悬浮细胞会不会聚集成团呢？我当时加的时候，贴壁完成出现粘连成片的细胞，这是什么原因呢？

lyj-0017

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& e0 O" m- J8 k- `( P; m% r4 Z! V# T0 x1 Y$ J' q) t( Y' q7 s
你说的都做了，但是结果还是很低啊？到底是什么原因呢？

lyj-0017

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# A* k5 G7 I- V0 S/ I+ z" |  v9 D" U4 v" P1 h
没有拍照片，所以还是想问一下啊，你在将单个核细胞加入75cm2培养瓶时，单个核细胞的密度是多少才不会出现2h贴壁之后悬浮细胞粘连的情况呢？

lyj-0017

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+ y/ L$ U. j: K9 b7 S
( a& h8 Y* O( y看了你发的CD3CD56流式检测图发现你是用的CD3-FITC和CD56-PE两种荧光抗体，那么你们是如何调节补偿的呢？是直接用CD3-FITC单阳和CD56-PE单阳进行补偿调节吗？两种抗体都做过同型对照吗？

lyj-0017

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8 |* l5 C6 ?' r0 d
# |% q3 C2 L& u4 R: B5 i: ], A1 c2 t为什么只用CD3-FITC来调节补偿呢？是因为CD56弱表达，CD56-PE跑到FL1通道的荧光少吗？

lyj-0017

回复 rocfield 的帖子0 _6 M; N8 e; Y
# |4 M; ~' d& ?! m0 M9 z
原来如此，恍然大悟啊，非常感谢！你们CD3CD56最高的有多少？最近做了一个达到40%多的

lyj-0017

回复 rocfield 的帖子+ S( {# x  X& e- S, D

' z4 i+ y2 s( l# }9 X2 e' P$ w是啊，我一开始测出来也不太相信这个数据，并且这个数据是培养天数较短的。
; e8 `( d- \* c7 G; A! u另外，你说的FL2通道漏到FL1通道信号的问题也是经验之谈，我自己用软件手动分析CD56-PE单阳管的补偿时，发现CD56象限的点图发生偏移的程度不大，基本都还是维持在自己的象限内，所以说还是认为你说的CD56-PE的补偿只需微调还是正确的。