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CIK细胞污染   [复制链接]

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楼主
发表于 2013-12-12 10:30 |显示全部帖子 |倒序浏览 |打印
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       我最近开始养CIK细胞,两次培养都在接种第二天后发现杆状物存在,能够运动,仔细观察发现其实是扁平椭圆状,侧面为杆状,怀疑是细菌污染,但是48小时培养液颜色依旧没有明显改变,取24小时培养液进行细菌培养,目前已经18h,还没有肉眼可见菌落,不知道是否为细菌污染?是什么污染?还有血小板在培养液中是什么形态?体外能否增殖?请各位大侠解答疑惑。
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沙发
发表于 2013-12-12 15:09 |显示全部帖子
回复 ciweiyuan 的帖子4 G$ @  {2 S2 l! L
2 |- ?- e. b5 p7 ?" p& Y) C
我用的是自体血浆,没有使用动物血清,那是否说明自体血浆里面存在胶原虫?这个虫子有什么特点?如何鉴定和去除呢?
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藤椅
发表于 2013-12-12 15:15 |显示全部帖子
回复 lyj-0017 的帖子
+ \& ^0 W+ w6 E- v5 E- P/ r+ d8 s, B1 j9 R6 P
接种后24h观察,培养液轻轻晃动有一层细沙状物质,怀疑是细菌污染,但是为何培养液经18h培养后却没看到菌落?黑胶虫该如何去除呢?我使用的是自体血浆,只是没有经过56°C灭活补体,人体自身会携带黑胶虫吗?
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板凳
发表于 2013-12-12 15:33 |显示全部帖子
回复 lyj-0017 的帖子
! x& @+ p, p  j( j; |5 ^' s  R2 _, n, ?$ ]( F5 F
是的,平板培养的。自体血浆灭活的话能消除黑胶虫吗?

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报纸
发表于 2013-12-12 15:42 |显示全部帖子
回复 ciweiyuan 的帖子( U3 H) }0 `, w5 M- H$ l

* n3 x1 x: g$ }% U8 D  L1 m+ d* ^确实是比较棘手的事情呢,谢谢你宝贵的经验

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地板
发表于 2013-12-12 20:45 |显示全部帖子
回复 cjq12862 的帖子
9 \/ }+ p+ n. U, I, G# A3 T9 f% ]5 w! D# N: l" U
寄生虫污染?可是两个标本是不同个体来源的呀

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7楼
发表于 2013-12-12 20:47 |显示全部帖子
回复 lyj-0017 的帖子1 \: r! v: C( ]

4 o# G; J2 ^$ r8 Z1 M前期处理采用PBS稀释血液,淋巴细胞分离液分离单个核细胞,然后再PBS清洗2遍,接种入培养瓶,应该是没有问题的呢

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8楼
发表于 2013-12-13 09:17 |显示全部帖子
回复 future007 的帖子/ N, A, r# n' G, G) u" G# J. M
( B& V  i# q- g1 U9 z* H
24h培养液细菌培养和真菌培养已经48h,结果是阴性的
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9楼
发表于 2013-12-14 08:52 |显示全部帖子
回复 Ernest 的帖子
) j, B7 @' W: H! t: o; g2 p$ A4 A: F! h3 x) l
是原地运动,但是奇怪的就是,第一次,我以为是细菌,把培养液用0.2um滤器过滤了,镜下观察没有发现其存在,但是4h后,又发现了大量的该物质,说明其能增殖,但是体外红细胞应该是不能增殖的吧,所以就解释不了,现在已经培养第4天了,该物质有破损迹象,但是又发现了不少黑色的小小的,能动,,类似传说的黑胶虫,我真是头大了,都不认识
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10楼
发表于 2013-12-14 08:56 |显示全部帖子
回复 水珠 的帖子
4 G& ?! r1 d5 ]& G$ N6 J% \& d6 a- @: Z0 m. |* o" Q4 l
真的吗?你们也是在养CIK中发现的吗?那这就是一种正常现象了咯?我感到奇怪的就是,刚接种的时候没有看到这个物质,但培养第二天就能发现很多,滤器过滤培养液后,培养基很干净(细胞是离心沉淀了的),但是培养4h后又能发现很多,说明其能增殖
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