培养CIK细胞贴壁了

daifenghao

最近在培养CIK时遇到一个问题：抽取癌症病人自体血，用T淋巴细胞分离液分离单个核细胞，诱导培养CIK，48h后，出现细胞几乎都贴壁了，请问这是怎么回事？

流泪的鱼

是DC前体细胞，未成熟的！

tianangelt

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: C1 i0 H4 `( H) F, S4 A+ I4 N- ~可能是DC细胞或者巨噬细胞。

lyj-0017

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8 r6 X3 l3 g/ a0 V/ w$ f: H/ ^
人家他说的是诱导培养CIK，那应该是用贴壁处理2小时之后的悬浮细胞进行诱导吧？贴壁处理就是为了去除掉单核、巨噬和DC的嘛

lyj-0017

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* j8 V0 {0 y9 [! o0 }& p+ j$ x: e6 O8 l, B
请问，你分离出单个核细胞之后，
+ T+ X' v4 y# Y' x0 c1、单个核细胞经贴壁处理2小时后，取出悬浮细胞，同时添加细胞因子诱导CIK？% R3 b5 `# j( r1 |1 k( B" f6 i
还是
( s4 _2 o3 u! \9 T6 c& O+ ?% `2、单个核细胞直接加入培养瓶，同时添加细胞因子诱导CIK？

daifenghao

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分瓶了，贴壁细胞和悬浮细胞分瓶培养，悬浮细胞诱导CIK，48H后观察出现几乎贴壁，但是再72H后观察发现贴壁几乎全部自行脱落，聚成细胞集落，培养液也变黄了并补液了，貌似一切又正常了，今天观察一切挺好！

daifenghao

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1 V* `4 `5 y; `, I2 v- e. _: n' a# E+ n
我都是种下6个小时后分瓶悬浮细胞诱导CIK

wf78365421

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. _6 c" V5 U" {4 k" q6 B贴壁的是DC

wf78365421

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3 V' i- Y( c7 ^, t8 c5 }; ?% R1 i- N: Z2 y) L1 b1 n
贴壁的诱导DC，不贴壁的诱导CIK。
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momoenn

如果不弃去贴壁细胞，而是等它自己悬浮，会不会对CIK 的纯度产生影响呢？