培养CIK细胞贴壁了

daifenghao

最近在培养CIK时遇到一个问题：抽取癌症病人自体血，用T淋巴细胞分离液分离单个核细胞，诱导培养CIK，48h后，出现细胞几乎都贴壁了，请问这是怎么回事？

流泪的鱼

是DC前体细胞，未成熟的！

tianangelt

回复 daifenghao 的帖子  {+ t6 Q1 N; F; F" j. Z: C$ B; p

9 T' o6 ]% S/ D& t3 h可能是DC细胞或者巨噬细胞。

lyj-0017

回复 流泪的鱼 的帖子8 k2 G& G* S) p

: y- s/ b; d! m* ?- I1 \人家他说的是诱导培养CIK，那应该是用贴壁处理2小时之后的悬浮细胞进行诱导吧？贴壁处理就是为了去除掉单核、巨噬和DC的嘛

lyj-0017

回复 daifenghao 的帖子/ ?% W; [: d- e

" {$ I; e# V$ t. c: q- y请问，你分离出单个核细胞之后，
, j# k0 _1 M$ Z, B- b9 D9 |1、单个核细胞经贴壁处理2小时后，取出悬浮细胞，同时添加细胞因子诱导CIK？0 X; m7 }; H- S( w
还是
3 G8 f, i0 W: t# V2 p3 I" U0 \* s2、单个核细胞直接加入培养瓶，同时添加细胞因子诱导CIK？

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子0 l2 s2 ~8 v* a+ J, G% n
' P! l' W% Z6 t7 x
分瓶了，贴壁细胞和悬浮细胞分瓶培养，悬浮细胞诱导CIK，48H后观察出现几乎贴壁，但是再72H后观察发现贴壁几乎全部自行脱落，聚成细胞集落，培养液也变黄了并补液了，貌似一切又正常了，今天观察一切挺好！

daifenghao

回复 lyj-0017 的帖子- }$ p& r5 M8 G0 D1 R% ]
* ^! v+ u5 G* q! D; @0 `% _2 ?
我都是种下6个小时后分瓶悬浮细胞诱导CIK

wf78365421

回复 daifenghao 的帖子
5 k. Y, Q2 j0 g( T9 B5 U% q
5 f* `& q. ~2 N% ~  M1 q贴壁的是DC

wf78365421

回复 daifenghao 的帖子
* G/ b: h( K1 i- c0 l- E7 Z  p. [; ^* S
贴壁的诱导DC，不贴壁的诱导CIK。# u' T, F2 W8 \2 ?" K" K1 D+ Z

momoenn

如果不弃去贴壁细胞，而是等它自己悬浮，会不会对CIK 的纯度产生影响呢？