人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：
0 U) s6 I9 ^7 |+ Y1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？9 }' g  K4 U7 e3 |
2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？% L& |+ H; f% g7 J3 q
谢谢！

zhusealin

贴壁后半量换液

mtdj1314

以我的经验，
5 F) x6 P: ^2 p. ~/ b  t1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗: L$ ]4 M# F6 F* Z1 W0 L. O2 i4 B
2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于细胞爬出。

willow0711

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0 X  Z; V4 @3 Y4 Q: o8 g+ I3 b; U  w+ M
哦，谢谢

willow0711

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% T6 D0 n! O0 t% ~2 r  t
哦，谢谢

willow0711

mtdj1314 发表于 2013-12-18 10:33
) F2 {% \( t: F; e: f以我的经验，
2 D& H, D" c( `( i3 o  A1、剥离脐带时候，得到的华通氏胶不需要再清洗
6 g, P5 z% A$ D1 A4 z2、在3-4天补充液体，7天半量换液比较有利于 ...

7 u  s/ B" @, f1 ]; q那你的方法，一般什么时候细胞爬出？多久传代呢

单个核细胞

6 S  }9 v* ~9 K9 B2 X3 ?( j& Y/ D' E
回复 willow0711 的帖子3 r9 q& X4 n/ {, Y5 X

- z+ m5 v' `& d( ]/ A" H1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；& H/ o" b8 G! E! c$ F: j# l1 [" ]
2.细胞能不能爬出来，个人认为跟你有没有洗涤没有多少关系；' J6 c$ i1 T) G1 w. R( H. I8 O) w- B
3.组织块贴壁3-5小时后，可直接加入完全培养液，放置9-10天后观察，可见少量细胞沿组织块周围爬出，这时候可去除组织块，全量更换新鲜完全培养液，再放置3天左右，首次传代即可。+ v5 g7 F4 @+ _
, B% O' c+ `) \
附图如下（点击图片可放大）：
; v+ S+ b/ b+ Q1 B. f# T% W; J3 ]
) r, c/ ?/ y& B& E

willow0711

回复 单个核细胞 的帖子) f+ K, L9 m1 X/ t5 }# R, w

+ M) y9 n0 ?' v9 R, L, r0 D哦

willow0711

单个核细胞 发表于 2013-12-18 11:50
* `4 j: M2 D2 {8 Q" u+ Y4 p6 d1 k! Q回复 willow0711 的帖子4 ^  d4 N/ C* `5 |8 S
: O! a. i* L- O" n
1.不需要特意洗涤，洗涤后水分较大，反而不利于组织块贴壁；

# N" [, v, g: n9-10天中间都不换液吗

zhangshich

有时候细胞就在组织块的底下，组织块脱落有部分细胞贴在板底。其实换液都没有一定，关键是不要让组织块漂浮起来。