人脐带植块培养清洗换液的问题

willow0711

在做脐带植块培养时，细胞爬出时间多数的是人家传代的时间，时间长的要2-3周多，不知道是什么原因。想问下各位大侠：& X/ |- n6 ^$ \6 `
1、脐带剥除脐动静脉和外表皮，得到的华氏通胶，是不是要把其多洗几遍，不那么粘稠了细胞才容易往外爬？
% J0 J5 J" @8 |( f7 X% _5 D2、植块贴壁后，是半量换液还是全量换液更利于间充干细胞爬出呢？8 b) m7 P  }8 u2 c
谢谢！

单个核细胞

回复 shunanqi 的帖子
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组织块贴壁培养中，可以不用换液，等到组织周围长出适量细胞来，你再换一次，这时候可以去掉脱落的组织块。然后过3天左右（根据细胞生长情况），就可以传代了。

单个核细胞

回复 zhoufan025 的帖子* i7 R8 S/ C$ _

6 y" _( o" B  N9 }原代培养的时候可以不着急去组织块，到首次传代时才去除，接种细胞至新的培养皿。若是不去除，组织块有大有小，移液管不能顺利吸取。你可以把去除的组织连同培养液加入到一个新培养瓶，让它继续长细胞。只要细胞长出来了，什么时候去除组织块不是大问题。

shunanqi

这真是每个地方的习惯都不同，我们的做法是剥离下来的胶不用洗，若洗会增加污染几率。正常培养的话5天一换液，一般换液俩次就长的差不多可以传代了。极少数需要换3次。: h, ^6 \8 V3 u! {; s

" J1 c' }3 g( Y5 B0 b' c0 K! N说点题外话，我想加咱们论坛的QQ群，申请了好几次没回音，

zhoufan025

回复 单个核细胞 的帖子! C0 z$ {9 z4 g
5 i! y' {0 f, E5 w! }" m+ A6 y5 k
你好！这四张图分别是第多少天的？我师姐说贴壁的组织块不用去除，就算传代后它也能继续爬细胞出来，我一般到P3代可以冻存的时候原皿里面都还有一点组织块，冻存时再去掉的。也不清楚一直留着这些组织块到底有没有用

willow0711

回复 月_幻影 的帖子6 D1 T3 M" V6 C5 o, \3 B8 j4 M

0 q9 @2 @- A+ n4 E0 ^+ g" F哦，谢谢

月_幻影

一般剥离前先冲洗干净血液，再去剥离出华通胶剪碎即可，不用再洗了，洗了反而不利于组织块贴壁。细胞爬出的情况一般因个体差异而异。

luyue6453

回复 18943340581 的帖子* A. H6 u$ P" Y  p% Y
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说的对哦，我确实越到到水肿的脐带，当时还没认为是水肿，只看着里面像是脓液。

luyue6453

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3 T$ d4 f/ c3 |4 u0 M$ s& v1 J! S$ O5 \6 c9 J4 P2 a  z; \
谢谢你了，等我也用这个试试，看看细胞能不能像你养的那样好。我的原代看着就有老化趋势。

18943340581

回复 luyue6453 的帖子
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4 r4 n4 B+ S5 [组织块在剪碎前要加入一点培养基，依据组织块量的多少确定加入培养基的量，不能加太多，加多后组织块不容易贴壁，我们一根脐带只剪出6个皿，剩余的脐带就不要了，这样剪碎前加入0.5-1ml左右的培养基，如果脐带有水肿，要减少加入培养基的量。