CIK冻存液配制？在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO”

xinquan15

冻存液可以20％血清，7-8％的DMSO，其余为培养基，在配置时，分两种液配制一个是冻存液1，培养基：血清：DMSO=45：40：15;另一种是培养基2；配制时培养基中加入血清，缓慢加入预先低温处理的DMSO,边加边摇晃；每次冻存时先用2液重选，按1:1比例加入1液，逐滴加入，边摇边加。

jojo1988509

培养基：血清：DMSO=5:4：1，先用培养基重悬，然后加含有20%DMSO的血清（4度预冷），DMSO对细胞有一定伤害，缓慢加入，血清可以起到保护作用，如果你不加血清直接往培养基里面加DMSO，你会发现培养基浑浊了……蛋白质变性了，就不能用了。

sunny.yc

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如果还要给人用的话，用FBS合适吗？

龙七

先加血清，DMSO要滴加，避免DMSO放热导致局部温度过高，混匀后放入4度冰箱预冷，和CIK细胞混合时最好也要在4度的环境中操作，不然对细胞的伤害很大，复苏后活率很低，细胞活力也会下降。

wf78365421

先加血清，然后再慢慢滴加DMSO，

sewing

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+ w7 D) x8 H! V# q# {. _冻存液包括培养基，人AB血清和DMSO。其中DMSO是10%，人AB血清10%--30%，血清比例可根据冻存复苏后细胞活力的情况进行调整，1mL冻存管里面的细胞密度为0.5-1×107。

chichao0000

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DMSO在4度时是结晶状态，因此DMSO说明中储存方法是常温保存。

星空雾雨

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冻存CIK只用血清和DMSO吗  比例是多少  1ml冻存液 可以冻存多少细胞？

ccst4838318

回复 aochongyu 的帖子) w' p- E1 {' z: b5 i4 O& o( N. o
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DMSO的话一般就是10%，血清就不一定了，波动范围很大，在90%~10%不等，培养基根据DMSO和血清的添加情况而定，冻存细胞的话一般不要超过1×107/ML.
3 a; m% t6 Q3 j如果非常介意产热影响的话，可以DMSO4°预冷后再用啊，至于先加后加的影响应该没想象中大吧，我们一般呢就是一起全部加进去，冷却下就用了，复苏细胞活性是很高的。

569981454

如果你的血清和DMSO都是无菌的，先后顺序应该影响不大把。不过按理说先加血清，如果血清不是无菌的，培养基和血清混合后再过滤除菌就可以，最后DMSO就好。配置比例为培养基：血清：DMSO=8：1：1。配好后放4℃冰箱保存。不过血清不固定一般10%-20%，但DMSO固定为10%。基础性知识建议平时注意多查资料，加油哦！