CIK冻存液配制？在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO”

aochongyu

在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO”，DMSO的加入速度是不是要很慢？希望得到大虾指点，谢谢

sewing

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先加血清，然后再慢慢滴加DMSO，因为DMSO加入培养基的过程中会产热，对细胞会有些影响，所以DMSO要慢慢滴入培养基，避免瞬间产热过多，避免温度上升过快。

ccst4838318

先加血清，然后再慢慢滴加DMSO，然后放到-20°冷却后，再转到4°保存以后备用或者冷却后直接用于细胞冻存，不可配好后马上用于细胞冻存

weijunning

一般是90%FBS+10%DMSO，先将此冻存液配好，放4℃冷却，之后拿出缓慢加入CIK细胞中，边加边混匀；如果有条件可以将冻存液和细胞都保持在4℃的环境下加冻存液。

aochongyu

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要先加血清，有时候可能会使蛋白质变性，可以先加DMSO吗？这样会产生什么不好的影响

aochongyu

回复 weijunning 的帖子8 k$ H+ M1 @9 p+ w

9 V# a/ Z; U* H3 P" g培养基加多少？要先加血清，有时候可能会使蛋白质变性，可以先加DMSO吗？这样会产生什么不好的影响

chimo100

先加血清一半的血清，然后加预先配好放4度冰箱保存的含20%DMSO的血清，这样可以将DMSO发热对细胞的影响降的最低。有条件的实验室，可以买一台小型的低温金属浴，在加DMSO母液的时候，把冻存管放金属浴里操作

月_幻影

先加血清，然后再将DMSO缓慢的滴加进去，这样可以防止蛋白质变性出现絮状物。。。

zxx547238354

培养基：血清：DMSO=5:4：1，先加培养基和血清，最后加DMSO。配好后放入4度冰箱冷却一段时间在使用。

zxx547238354

weijunning 发表于 2013-12-24 10:39
  L2 }/ a& g' b1 j0 L" L一般是90%FBS+10%DMSO，先将此冻存液配好，放4℃冷却，之后拿出缓慢加入CIK细胞中，边加边混匀；如果有条件 ...

( r. |5 K. `( b1 o
你们使用胎牛血清来冻存人细胞？？？最好是HSA.