干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站 干细胞之家论坛 免疫细胞治疗专区 CIK冻存液配制?在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO” ...
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
楼主: aochongyu
go

CIK冻存液配制?在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO”   [复制链接]

Rank: 3Rank: 3

积分
843 
威望
843  
包包
2224  

金话筒 优秀会员

11
发表于 2013-12-24 14:45 |只看该作者
回复 aochongyu 的帖子$ n1 ]; Z* R. u3 s6 f6 ?

0 G4 B7 }! X' q: {5 ^! U我们不用培养基作为冻存液成分之一,而是90%FBS+10%DMSO直接配制成冻存液使用。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 3 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 3  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
843 
威望
843  
包包
2224  

金话筒 优秀会员

12
发表于 2013-12-24 14:48 |只看该作者
回复 zxx547238354 的帖子
5 _+ H  G3 z% H( W, ^3 [4 Z6 z4 q! d( \5 A1 I9 z; ]
如果是临床 当然是HSA最好,但往往HSA比较难买到,冻存时所需量比较大,从实际操作性看还是FBS比较好。如果是科研,FBS就可以了。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 1

积分
26 
威望
26  
包包
170  

帅哥研究员

13
发表于 2013-12-24 16:32 |只看该作者
回复 zxx547238354 的帖子
* }) A# J* F" D2 W$ F5 [5 o5 |9 F" {+ r4 G
一般都是胎牛血清……
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
129 
威望
129  
包包
427  
14
发表于 2013-12-24 17:05 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
如果你的血清和DMSO都是无菌的,先后顺序应该影响不大把。不过按理说先加血清,如果血清不是无菌的,培养基和血清混合后再过滤除菌就可以,最后DMSO就好。配置比例为培养基:血清:DMSO=8:1:1。配好后放4℃冰箱保存。不过血清不固定一般10%-20%,但DMSO固定为10%。基础性知识建议平时注意多查资料,加油哦!
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
369 
威望
369  
包包
997  

金话筒 优秀会员

15
发表于 2013-12-25 14:50 |只看该作者
回复 aochongyu 的帖子
( K6 U$ s3 i7 n. S0 b9 I% }7 m5 U) p1 e3 ]9 _! ]' i
DMSO的话一般就是10%,血清就不一定了,波动范围很大,在90%~10%不等,培养基根据DMSO和血清的添加情况而定,冻存细胞的话一般不要超过1×107/ML.
, F3 c4 s( A3 r4 |. s- h' L如果非常介意产热影响的话,可以DMSO4°预冷后再用啊,至于先加后加的影响应该没想象中大吧,我们一般呢就是一起全部加进去,冷却下就用了,复苏细胞活性是很高的。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 20 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 6  包包 + 20   查看全部评分

Rank: 1

积分
21 
威望
21  
包包
201  
16
发表于 2013-12-27 15:04 |只看该作者
回复 sewing 的帖子
# F& F. ^2 p( ?  I
2 W" i/ S# _" R4 S! |' s; e冻存CIK只用血清和DMSO吗  比例是多少  1ml冻存液 可以冻存多少细胞?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 3Rank: 3

积分
810 
威望
810  
包包
1911  

金话筒 优秀会员

17
发表于 2013-12-30 06:04 |只看该作者
回复 ccst4838318 的帖子
6 E3 u" `# x  c% B# d* E3 ]4 o" B, C6 O) M) ^5 _8 n
DMSO在4度时是结晶状态,因此DMSO说明中储存方法是常温保存。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
115 
威望
115  
包包
7  
18
发表于 2013-12-30 08:55 |只看该作者
回复 星空雾雨 的帖子
+ Y/ o9 J9 m/ `+ w9 z2 u4 [" h! r& z: M* p7 _0 x
冻存液包括培养基,人AB血清和DMSO。其中DMSO是10%,人AB血清10%--30%,血清比例可根据冻存复苏后细胞活力的情况进行调整,1mL冻存管里面的细胞密度为0.5-1×107。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 6 + 15

总评分: 威望 + 6  包包 + 15   查看全部评分

Rank: 4

积分
1250 
威望
1250  
包包
219  

金话筒 优秀会员

19
发表于 2013-12-31 11:04 |只看该作者
先加血清,然后再慢慢滴加DMSO,
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 10 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 10   查看全部评分

Rank: 2

积分
52 
威望
52  
包包
17  
20
发表于 2014-1-8 15:42 |只看该作者
先加血清,DMSO要滴加,避免DMSO放热导致局部温度过高,混匀后放入4度冰箱预冷,和CIK细胞混合时最好也要在4度的环境中操作,不然对细胞的伤害很大,复苏后活率很低,细胞活力也会下降。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 5 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5  包包 + 15   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-3-22 19:49

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.