CIK冻存液配制？在培养基是先加“血清”还是先加“DMSO”

weijunning

回复 aochongyu 的帖子5 {! p2 m; T; K9 \2 I$ [) k( k

! \7 X0 k, t& G2 T* m我们不用培养基作为冻存液成分之一，而是90%FBS+10%DMSO直接配制成冻存液使用。

weijunning

回复 zxx547238354 的帖子) B# d9 D) z' [4 Q0 S5 M

8 [" B* a; m0 ]如果是临床 当然是HSA最好，但往往HSA比较难买到，冻存时所需量比较大，从实际操作性看还是FBS比较好。如果是科研，FBS就可以了。

指下人生

回复 zxx547238354 的帖子
: o3 h$ O/ u* |; h* R. }
/ `7 i( @3 [8 V  \5 N7 S一般都是胎牛血清……

569981454

如果你的血清和DMSO都是无菌的，先后顺序应该影响不大把。不过按理说先加血清，如果血清不是无菌的，培养基和血清混合后再过滤除菌就可以，最后DMSO就好。配置比例为培养基：血清：DMSO=8：1：1。配好后放4℃冰箱保存。不过血清不固定一般10%-20%，但DMSO固定为10%。基础性知识建议平时注意多查资料，加油哦！

ccst4838318

回复 aochongyu 的帖子
' q1 Z: L1 d+ x" r" H
/ H& M6 |' B( p: QDMSO的话一般就是10%，血清就不一定了，波动范围很大，在90%~10%不等，培养基根据DMSO和血清的添加情况而定，冻存细胞的话一般不要超过1×107/ML.6 T, {5 J$ D$ p
如果非常介意产热影响的话，可以DMSO4°预冷后再用啊，至于先加后加的影响应该没想象中大吧，我们一般呢就是一起全部加进去，冷却下就用了，复苏细胞活性是很高的。

星空雾雨

回复 sewing 的帖子4 D' s4 B/ R4 E# Y/ b
; c- y) Y: @. w6 j% K) E7 u
冻存CIK只用血清和DMSO吗  比例是多少  1ml冻存液 可以冻存多少细胞？

chichao0000

回复 ccst4838318 的帖子( [: W8 @6 T5 z! \  ]) m
; q; b) [3 r; n5 E. p) O. q
DMSO在4度时是结晶状态，因此DMSO说明中储存方法是常温保存。

sewing

回复 星空雾雨 的帖子1 A) k& R5 `/ ~( G1 M. d3 P0 Z

7 O/ O3 i) _; K冻存液包括培养基，人AB血清和DMSO。其中DMSO是10%，人AB血清10%--30%，血清比例可根据冻存复苏后细胞活力的情况进行调整，1mL冻存管里面的细胞密度为0.5-1×107。

wf78365421

先加血清，然后再慢慢滴加DMSO，

龙七

先加血清，DMSO要滴加，避免DMSO放热导致局部温度过高，混匀后放入4度冰箱预冷，和CIK细胞混合时最好也要在4度的环境中操作，不然对细胞的伤害很大，复苏后活率很低，细胞活力也会下降。