骨髓细胞核型分析

goblinwang

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- w6 Q: W9 G4 t, J( ~

2014-1-15 17:19 上传

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40X10

请教各位前辈，骨髓细胞核型分析时，有哪些因素会影响滴片效果，下图是我做的一张片子，在40倍镜下拍摄
" g0 Y. p, v- f; Z. W2 B" V我想请教的问题：其一为什么一个视野下很多细胞似乎没破，染色体出来的很少是为什么，我滴片的高度大约是20cm9 Z: ]7 r. a# G1 j) I
其二，用秋水仙素是细胞处于分裂中期是为了让染色体形态比较规整，明显，但是那些没有处于中期的细胞的染色体能否被观察到

dxb1985

回复 goblinwang 的帖子0 |% m' l6 ?* @, q( u4 U2 ?- D/ D

3 i8 M% d% ?4 ~- {0 I- h是抽骨髓细胞做的吗？分裂相少原因有很多，最重要的是低渗是否到位，低渗后红细胞是没有的，所以固定时细胞为纯白色，如果低渗过度，固定时细胞损失很多。还有用的片子要洗干净，不能有有机物，否则会影响分裂相破裂。

goblinwang

5 M! r$ y5 f2 O. s; W9 @) t. n' \
  v, I5 X- t) f' @
我先裂红然后在培养，用秋水仙素处理两小时，固定的时候是纯白色，而且感觉像是棉絮，我这张片子拍了，我感觉是低渗时间短了，不知道，您怎么理解，拨片我用无水乙醇-30浸泡，用的时候才拿出来，不过没酸处理，希望能听听您的意见，谢谢，，方便的话，交个朋友，有机会多向您学习学习，我才刚开始做核型，谢谢。。。。这张是我油镜拍的，您觉得这张小鼠的骨髓处于分裂中期了吗，

2014-1-16 12:34 上传

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，刚才我师姐提醒我，似乎没看到姐妹染色单体，

dxb1985

回复 goblinwang 的帖子
# H2 l7 i% Q3 {: i& r& i7 D$ `9 |7 W0 \; n
这张图是中期，小鼠染色体全部为端着丝粒染色体，图中两条臂分开了，如果做G分带的话，这种分裂相不太合适

laner

请问goblinwang ，你做Gimesa染色了吗？

细胞海洋

回复 goblinwang 的帖子
& }" t( G. E0 V% [8 k) H8 g
, W" J+ E, U+ d4 K- @请看5楼

细胞海洋

回复 laner 的帖子% e* Q: y! r4 Y1 B
9 t5 M! F9 ^' o) i
你回复谁 就点击对方回复帖子中的回复按钮 然后输入内容 像我这样
2 N. S3 u+ h. w+ {
) J) m7 Y/ m2 j' M) f- v否则他会看不到

goblinwang

回复 laner 的帖子
  F2 G8 F% L6 P+ m2 |6 E0 w& c: M
% Y, o% v4 `  O5 x, J" J& S是的，感觉，不是很好，用油镜拍的片子都不是很干净，实验技术，不怎到哪儿出了问题，您能提出点整改意见吗，谈谈您的经验，操作过程中。哪些步骤很需要留心呢

laner

回复 goblinwang 的帖子5 B  c, O4 [! u8 r; o

4 a* N+ o- I7 q% T$ d# G我最近也在做G显带，效果也不是很好，相互交流吧。我觉得低渗的时间非常重要，我之前低渗25min染色体分散不够，30min'有发现有断裂零碎的染色体，我打算做个时间的水平实验。还有就是吹打细胞低渗后要轻柔，不要把细胞吸到吸管上在吹打，很容易造成细胞的损失。制得好的玻片后，我觉得胰酶消化的时间和浓度对于染色和显带最为重要，这个时我一直没攻克的，不知道你有什么见解？

laner

回复 goblinwang 的帖子6 C3 _. y$ o* x; J9 \/ L% z: G
3 x! Y0 ^3 q1 H1 N0 ~* [
片子都不是很干净，要注意玻片的洁净度，老化玻片时，最好密闭保存，还有就是染色液最好过滤后在使用。