心肌分化的paper，共享一下了【原作者发布 欢迎提问】

Jonathan

; u: C* R; n7 B1 r! q' o
2 m. M3 ~$ Z: d2 f
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24564569
/ F: s6 h! i9 U5 }7 g
; L! }7 R* t' w) e7 b9 c' u" D看看接收的。有问题可以问我
  S' E% _. v" f" N7 G* q. J/ W7 Q7 U! c) l& `; o# A) X9 {
海洋注：5楼原文

Jonathan

回复 chips100 的帖子5 }# ^6 g/ C/ y4 N' p9 j4 L7 M
8 v7 M" b+ q8 [9 [8 R; a
测指标基本都在30多天测的。主要用patch clamp，其他指标我们直接用auto-patch的机子测其他current

Jonathan

回复 智露 的帖子0 J( ^7 c) Q. d" y! L

$ G- m' N/ ~% g4 {悬滴法是比较原始的。细胞状态很重要。我做的不多。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子" [4 V/ _8 @  W. h& z# _2 Y# W1 X1 m

' Q) w, d. ~0 S, o1 [) @  r6 a- |$ F你看看我这个paper里面写的方法，效果很好。一个well，可以形成6-12个well的悬浮EB，每个well有大概1000-2000个EB球。EB形成多少和细胞系有关，还和细胞的状态有关

Jonathan

回复 刘森泉 的帖子) l: B8 X. t2 z( |) |
  \$ O/ b1 t7 W9 [" W8 @) y0 _. ?" i
消化成单细胞后，加matrigel，其实是用4度的mTeSR1把matrigel溶解。所以肯定还是液体培养。有试过用normaxia的，效果不如hyperxia的好。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子# J1 Z% L! |) {1 U5 L6 t8 L4 ]* D

% y0 g( |% m4 a0 x$ D( a5楼有原文。你可以下载。用的都是人的ES或者IPS

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子
# s( O$ [5 ]: A; u0 Y
. G1 ]- w5 e' J" R  P, D你想看的video是指cluster状态的还是消化后monolayer的？

Jonathan

回复 spongezhao 的帖子# F( U. t* p; D% i
9 u. h& ?  @5 H' n
用collegenase IV消化20-30分钟，然后0.05的trypsin消化5分钟。铺到10mm玻璃片上面就可以。等过几天细胞就可以用了。每个玻璃片大概5000个细胞

Jonathan

( _  h6 r  @% @5 U/ k
9 Y, Z, d  K2 }9 S+ T回复 spongezhao 的帖子
" B9 i$ W, b% P* c& |9 @! i3 n5 e$ C, t" V9 |! c
消化之后用的是Stempro 34+VC.一路悬浮培养。

Jonathan

回复 spongezhao 的帖子
0 d7 I& O+ t6 l' i
+ {/ Z/ c) R) l% Jmatrigel根据公司来的单子，你自己计算一下。每次加的量稍稍不同