心肌分化的paper，共享一下了【原作者发布 欢迎提问】

Jonathan

* f  s( z6 C( D
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http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/245645699 U7 a4 H) L/ V: C3 T, A' _; \
9 z  j0 U7 a, O$ |1 l0 n3 m$ X
看看接收的。有问题可以问我9 \  ]) @0 g: s
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海洋注：5楼原文

chips100

心肌最后分化到几天，测的心室肌指标

智露

我现在怎么每次悬滴到悬浮状态中看到的EB好小，不知道为何数目不够，以前做的都很好，我确定计数没有问题，是mES不行吗？

zhouhuaxizhu

这篇文献用的是人的胚胎干细胞或者诱导多能干细胞通过EB做的心肌分化实验，我没有全文权限。我做过几次人的多能干细胞EB法分化细胞，都没有形成EB，我不知道原因在那儿，鼠的就非常容易而且成功获得心肌细胞。请有经验的大侠们不吝赐教。

xiao_jiajia

A simple, cost-effective but highly efficient system for deriving ventricular cardiomyocytes from human pluripotent stem cells.

Jonathan

回复 chips100 的帖子! W0 s% z# j2 q4 \0 d* g* s" p3 ~

2 p* _% u9 t9 r" d. ?# y1 E测指标基本都在30多天测的。主要用patch clamp，其他指标我们直接用auto-patch的机子测其他current

Jonathan

回复 智露 的帖子
1 _! R8 w* ?9 W- \* v. {7 @9 u, \" m2 D: u1 R4 g' o0 c9 W/ r
悬滴法是比较原始的。细胞状态很重要。我做的不多。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子
  V9 a0 Z5 }) T: o' }! \
3 D) n( ^! v" `/ ^5 i8 n" G# I2 C你看看我这个paper里面写的方法，效果很好。一个well，可以形成6-12个well的悬浮EB，每个well有大概1000-2000个EB球。EB形成多少和细胞系有关，还和细胞的状态有关

刘森泉

回复 Jonathan 的帖子  x8 a  p% m0 z: K

4 y" s! _  g: R& O# H请问第1天消化成单细胞后培养在mTesR里，加Matrigel(40 μg/ml)？是固体培养？还有有试过开始几天也常氧培养吗？谢谢。

Jonathan

回复 刘森泉 的帖子6 Z! Y2 q' z6 o3 _+ A4 ~# X/ A- n& F

* t6 b& C" B8 Q  B. ^  p消化成单细胞后，加matrigel，其实是用4度的mTeSR1把matrigel溶解。所以肯定还是液体培养。有试过用normaxia的，效果不如hyperxia的好。