心肌分化的paper，共享一下了【原作者发布 欢迎提问】

Jonathan

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9 ]" w, j" H8 h1 t/ e0 jhttp://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24564569( r; x) D/ E: n6 @( E- P+ D( R

6 ]* q' I- e$ g& P6 z看看接收的。有问题可以问我
* O+ M+ U6 u5 L2 c0 E' ~4 k' `- x  L1 K# T+ _. z( l
海洋注：5楼原文

Jonathan

回复 chips100 的帖子* ~, L8 n+ L+ W! \

3 }0 ^/ u' C% K( G" n  C+ u测指标基本都在30多天测的。主要用patch clamp，其他指标我们直接用auto-patch的机子测其他current

Jonathan

回复 智露 的帖子) c* L4 }9 T( ]% ?( @! h4 I

' m& w# G% b) q: n3 ~悬滴法是比较原始的。细胞状态很重要。我做的不多。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子
6 i* X; Y( L9 W- h! C0 [6 U" O* M, m
你看看我这个paper里面写的方法，效果很好。一个well，可以形成6-12个well的悬浮EB，每个well有大概1000-2000个EB球。EB形成多少和细胞系有关，还和细胞的状态有关

Jonathan

回复 刘森泉 的帖子/ W" E5 |. d" R1 g: v1 [

2 P- m1 c( B6 j. B% D1 c1 ^) n消化成单细胞后，加matrigel，其实是用4度的mTeSR1把matrigel溶解。所以肯定还是液体培养。有试过用normaxia的，效果不如hyperxia的好。

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子( k3 J( m* F# G' `$ U4 L6 R
1 _7 K) ?% Q( K5 M9 t4 I$ h
5楼有原文。你可以下载。用的都是人的ES或者IPS

Jonathan

回复 zhouhuaxizhu 的帖子6 {% D; ~" B- @5 w! u* T

% X- U) U* y1 I你想看的video是指cluster状态的还是消化后monolayer的？

Jonathan

回复 spongezhao 的帖子
, r9 T& r8 v, J& E' f% R- X: Y8 D) i( X, J( c- ?" E: o
用collegenase IV消化20-30分钟，然后0.05的trypsin消化5分钟。铺到10mm玻璃片上面就可以。等过几天细胞就可以用了。每个玻璃片大概5000个细胞

Jonathan

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回复 spongezhao 的帖子4 A0 I9 {. ~2 U! q& Q
' I) y, h  `0 Z
消化之后用的是Stempro 34+VC.一路悬浮培养。

Jonathan

回复 spongezhao 的帖子
! u6 t! \- g' h" X/ m# c+ p( z2 j+ L2 G8 {+ h  d
matrigel根据公司来的单子，你自己计算一下。每次加的量稍稍不同