包被方法诱导NK细胞的可能性！！！

大海之家

大家好，小弟现在在做NK方面的研究，有文献报道，单纯依靠可溶性细胞因子如IL-15，IL-21，IL-7，IL-18或者单抗CD137等是很难诱导足够数量的NK细胞的，所以我想采用包被的方法。单抗和这些细胞因子容易包被在培养瓶吗，不知道大家有没有做过类似实验呢，欢迎大家指点迷津！不甚感激。

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这个是我有疑惑的地方之一，看了很多文献，都说NK诱导单靠可溶性细胞因子是很难大量扩增的，固相刺激反倒有些效果，我打算用CD137和IL-21联合包被，IL-21 1000U每ml，看看效果。另外，大家是用专门的NK分离液分离NK，还是用淋巴细胞分离液分离?有没有使用专门的NK培养基培养NK呢？

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回复 weijunning 的帖子* e, u+ f9 Q8 u/ b

7 Z2 _5 l9 n* p& J# v! l9 V, d+ P这个是我有疑惑的地方之一，看了很多文献，都说NK诱导单靠可溶性细胞因子是很难大量扩增的，固相刺激反倒有些效果，我打算用CD137和IL-21联合包被，IL-21 1000U每ml，看看效果。另外，大家是用专门的NK分离液分离NK，还是用淋巴细胞分离液分离?有没有使用专门的NK培养基培养NK呢？

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回复 zhenhuale 的帖子2 w! t) _/ q# y) b1 ?* a, |6 b; k

6 s6 Q( B8 [( W$ a有没有其他你觉得可以的方法？你们做的数量和表型能达到多少？
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大海之家

回复 zhenhuale 的帖子- q+ l* K8 P" L0 k
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你们NK是如何分离的？是直接用PBMC培养，还是使用分选系统进行NK的分选？

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回复 weijunning 的帖子
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3 i- w7 T/ T: h! l+ K能分享下你们大概的一个培养方法吗，比如说采血量是多少，培养基总的体积，最终的培养数量是多少等等，另外，使用了这种培养基的同时还需要对细胞进行前期包被处理？

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回复 zhenhuale 的帖子; y! `. W5 D5 w1 {

( e/ O4 \. C% I$ D请问你们NK细胞培养是使用NK细胞培养基还是淋巴细胞培养基的？是包被诱导还是悬浮诱导？