包被方法诱导NK细胞的可能性！！！

大海之家

大家好，小弟现在在做NK方面的研究，有文献报道，单纯依靠可溶性细胞因子如IL-15，IL-21，IL-7，IL-18或者单抗CD137等是很难诱导足够数量的NK细胞的，所以我想采用包被的方法。单抗和这些细胞因子容易包被在培养瓶吗，不知道大家有没有做过类似实验呢，欢迎大家指点迷津！不甚感激。

sonsyoran

今天看到一个专利上写用CD3和CD52包被，再用IL2刺激。仅供参考

yanglixia1984

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6 a( P: X5 ~+ R' X+ Z5 }7 i* s2 m$ {
3 ^, u# n; E0 V3 v7 B. ]) C普通的培养基就可以了

yanglixia1984

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" E% a% [9 u# R0 M
$ Z$ S+ c( t! M: N" Y. a% Q" F你好能分享一下NK 的培养流程吗

yanglixia1984

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$ }3 C4 B) n6 q6 f# Y5 I' n8 L  n- L文献上有将这些因子通过转基因的方法表达与滋养细胞表面，然后与单个核共培养

yanglixia1984

回复 weijunning 的帖子" ~4 R' F, Z( Q6 h2 {
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把因子直接包被到培养瓶上吗，如何包被呢

gondobar

包被的方法挺实用的，可以选择包被，血清用自体的，一般1%，看细胞状态适量调整。培养基干细胞的就行。

ccst4838318

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/ B: F( o! R' I; q, j9 n什么培养基，有没有跟其他的淋巴细胞培养基做下对比，到底有多大的提升空间？我们做的没有进行培养基包被，因为是做临床治疗的，为了安全起见，虽然细胞量还可以，但是纯度较低，因此我非常想知道包被之后的NK细胞量和纯度上，在同样的培养体系下，和未包被的到底有多大的差别？所以想问问你，能不能给个具体的数据支持呢？

ccst4838318

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& K. j4 [! l/ E% _50ml细胞量扩增20亿个细胞，就细胞量上来说不是太多，但是90%的纯度确实很高，你是怎么做到的，免疫磁珠分选了吗？我用50ml血可以扩增细胞量达到60亿个左右，但是纯度很低，CD3-/CD16+/CD56+细胞只有30%，对于你的90%我很好奇？还有就是你说你用的专门的NK细胞培养基，请问是什么培养基?

ccst4838318

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  K5 e5 o8 s' I4 }4 _  Q$ S. I7 T50ml血扩增20亿个细胞单细胞量确实不怎么多，但是你的纯度可真是高啊，是CD3-/CD16+/CD56+细胞达90%，还是只是CD3-/CD56+细胞达到90%呢？想问下你这个这么高的纯度是怎么做到的？还有就是你的细胞因子是不是用的有点多呢，我们只用三种细胞因子细胞量就能达到60个细胞，但是纯度相对很低，CD3-/CD16+/CD56+只有30%，培养瓶没有包被。4 J8 H( x7 E1 R$ I9 k) J
再问下，你用的是什么NK细胞专用培养基？; C! r6 a2 C$ H+ @4 t