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293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。( f' O' N; M6 F2 c2 b+ M0 y
5 ?" n/ s% M' g5 |4 ~( h3 p
来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。
$ s$ S- i% ~; d% ^' e+ A2 c0 i- I/ h
" j4 w, I/ s: W9 p培养液:完全培养基。" Y* p: n0 m$ R
1 M6 w! e, a2 Q+ W8 Q传代: 吸去培养液。 胰酶消化,以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次。6 u3 h; Q m O: A- Z
冻存:90%培养液+10%DMSO冻存于液氮。 O' ]6 |8 G. A5 p5 `- q
2 y+ K$ l' B$ ^/ H293A:是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).
" f# V/ q% \ H; j293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
6 [- l5 J% z4 W' i$ {293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
: P/ |, b: k( d" s1 v l: I293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。 |
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