干细胞之家 - 中国干细胞行业门户第一站

 

 

搜索
中源协和

免疫细胞治疗专区

欢迎关注干细胞微信公众号

  
查看: 20885|回复: 1
go

[请教] 293FT 细胞可以测病毒滴度吗? [复制链接]

Rank: 1

积分
1 
威望
1  
包包
5  
楼主
发表于 2014-3-7 11:00 |只看该作者 |正序浏览 |打印
干细胞之家微信公众号
293FT 细胞可以测病毒滴度吗?
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 1 + 5 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 1  包包 + 5   查看全部评分

Rank: 2

积分
106 
威望
106  
包包
429  
沙发
发表于 2014-3-7 17:31 |只看该作者
293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。( f' O' N; M6 F2 c2 b+ M0 y
5 ?" n/ s% M' g5 |4 ~( h3 p
来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。
$ s$ S- i% ~; d% ^' e+ A2 c0 i- I/ h
" j4 w, I/ s: W9 p培养液:完全培养基。" Y* p: n0 m$ R

1 M6 w! e, a2 Q+ W8 Q传代: 吸去培养液。 胰酶消化,以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次。6 u3 h; Q  m  O: A- Z
冻存:90%培养液+10%DMSO冻存于液氮。  O' ]6 |8 G. A5 p5 `- q

2 y+ K$ l' B$ ^/ H293A:是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).
" f# V/ q% \  H; j293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
6 [- l5 J% z4 W' i$ {293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
: P/ |, b: k( d" s1 v  l: I293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。
已有 1 人评分威望 包包 收起 理由
细胞海洋 + 2 + 15 欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2  包包 + 15   查看全部评分

‹ 上一主题|下一主题 ›
你需要登录后才可以回帖 登录 | 注册
验证问答 换一个

Archiver|干细胞之家 ( 吉ICP备2021004615号-3 )

GMT+8, 2026-10-15 03:48

Powered by Discuz! X1.5

© 2001-2010 Comsenz Inc.