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[请教] 293FT 细胞可以测病毒滴度吗? [复制链接]

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楼主
发表于 2014-3-7 11:00 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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293FT 细胞可以测病毒滴度吗?
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沙发
发表于 2014-3-7 17:31 |只看该作者
293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。
9 _; n2 _1 o* l7 [
9 z$ t7 Q4 L9 {: Q+ B来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。# a$ l' P% Z/ ]: C% o. {0 g$ h

2 U( E: ]/ @8 u/ T' G培养液:完全培养基。
7 s9 W3 I7 o  `" r( _+ ^8 Z. {( E; v3 s2 s$ ^
传代: 吸去培养液。 胰酶消化,以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次。
, B) f1 G  g( r$ R5 o9 E冻存:90%培养液+10%DMSO冻存于液氮。/ R  O: s2 r/ ^+ E4 q. u
( e; g$ z; f) _0 i
293A:是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension)." c- B: L4 t4 Y  N9 {
293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
$ d9 v/ x- i+ |293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。+ h& x0 [" D1 C$ C. a) N
293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。
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