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293细胞的缺陷是生长过程中贴壁强度比较小。所以在实验过程中容易流失,从而影响实验结果。如果一个实验室新得到的293细胞是邮寄得到的并且细胞在培养瓶中,就需要让细胞沉降几天时间,因为大量细胞会漂浮在培养液里。
1 L: o/ y' x6 I5 R8 b
6 i5 P& f$ ]3 i6 J6 k. s来源:人体肾脏 形态:上皮细胞 生长特性:贴壁 注释:该细胞含腺病毒5 DNA 。1 P; m8 L/ e$ V) Y
! d! k& O4 b! d$ z培养液:完全培养基。 ?% Q* {# x' A7 y
3 G o h' T; J. B# m传代: 吸去培养液。 胰酶消化,以1:2到1:4为宜,传代期间培养液2-3天更换1次。& B6 T0 L, ^2 [5 v* f- C
冻存:90%培养液+10%DMSO冻存于液氮。) ~* Q% U5 y y/ @
2 n& D B0 v- f7 C* n; a293A:是293中后来又建的细胞亚株,这个A是adhere的意思,就是说293倾向于形成单层细胞(monolayer),它比293好的地方是在做计算病毒数量的空斑试验(plaque assay)293A是均匀的一层,没有细胞重叠和细胞空隙(hole),就这个意思,这个A所对的是293S(suspension).5 a) v, @) T6 C2 ^' [; p3 {
293细胞系是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒(Ad 5) DNA的永生化细胞,表达转染的腺病毒5的基因。
4 f9 T' B- X; N. C2 n9 ?$ x- X293T细胞表达 E1A蛋白,S40大T抗原,含有S40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。
- N( R' h/ J+ _- ~3 m5 }. ~% S293FT细胞能制造高滴度的慢病毒。293A细胞来源于人肾纤维母细胞,组成性表达 E1A 和 E1B 蛋白。 |
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