人胚胎干细胞求助

CD603572813

各位大侠：最近刚开始学着养人胚胎干细胞x-01!可是这个细胞貌似很矫情啊，养着养着就分化了，在此向给位求教，一般采取什么措施可以减少细胞细胞分化啊？或者各位有何经验之谈？谢谢各位了

老十

个人觉得，人的干细胞的培养要每天换液，操作要规范，看到有分化的要及时处理。

CD603572813

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0 W6 c$ b* t/ A4 C* }' F: D这个分化了的要怎么处理呢？我是用培养瓶养的

老十

刮掉吧

nichifanlema2

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$ K! i5 O) g- }5 ]
9 v' ^+ V) t( v4 ]! Y& L  _0 w. q摸索最适的饲养层密度，饲养层细胞的密度很重要。人的ES一般用CF-1品系小鼠失活的MEF作为饲养层。ES的密度也不要过于密集。

ciweiyuan

1.饲养层密度2.5x104/cm25 E) f  M: ?( Y. ]0 k, m- j% U9 f% [
2.用cf1品系
9 S/ H0 q; g0 r& E( t3.ips不要养太密$ S0 ^* Q5 Q' M8 u
4.每天必须换液

Jonathan

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) @8 t$ M, R. G7 j0 ~0 J% g- }4 k& p7 e! X
你这个feeder的密度太高了吧?

CD603572813

回复 nichifanlema2 的帖子9 y2 H: i' t1 j; J
$ M' U& V6 Y/ t) `% N
您BFGF的浓度一般用到多少呢？我买的是10微克一只的

CD603572813

回复 ciweiyuan 的帖子
4 w  b; w" A. V1 K5 |% p- n/ S! j7 G$ l$ ?( v3 r2 a; b
我现在遇到了两个问题：一、已经分化了的细胞我还不知道该怎么处理掉，之前有人建议说挂掉，可我是养在培养瓶里面的，所以这个操作对我来说有点难，不知道您是怎么处理分化的细胞的？二、已经长大的克隆，您是怎么处理使其变小的？我用的是枪头吹打的，这样一来会产生很多起泡影响吹打的效果，同时这样吹打貌似对细胞的损伤也会比较大，不知道这个问题您是怎么处理的？谢谢啦

CD603572813

回复 Jonathan 的帖子4 e3 g0 j# v1 p9 u$ ]
4 k6 Z. L) s3 c9 Z: Y" x6 r
那您建议用什么密度更好一点呢？