人胚胎干细胞求助

CD603572813

各位大侠：最近刚开始学着养人胚胎干细胞x-01!可是这个细胞貌似很矫情啊，养着养着就分化了，在此向给位求教，一般采取什么措施可以减少细胞细胞分化啊？或者各位有何经验之谈？谢谢各位了

老十

个人觉得，人的干细胞的培养要每天换液，操作要规范，看到有分化的要及时处理。

CD603572813

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6 U2 @9 U3 J0 |+ }6 w' n
# r3 ^5 |& j! E: L( Z; Y6 Q" `5 ?这个分化了的要怎么处理呢？我是用培养瓶养的

老十

刮掉吧

nichifanlema2

回复 CD603572813 的帖子2 n( Z" ~2 T# d
+ n- f6 ~( O( G8 |) a7 T
摸索最适的饲养层密度，饲养层细胞的密度很重要。人的ES一般用CF-1品系小鼠失活的MEF作为饲养层。ES的密度也不要过于密集。

ciweiyuan

1.饲养层密度2.5x104/cm2
: y3 V. [6 [' {& U, R' z2.用cf1品系3 {* T6 F6 H* J, t' `8 \
3.ips不要养太密2 S7 ^! t- m# Y! N. U( Y
4.每天必须换液

Jonathan

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  a+ \" Y7 y  u& g) f
  M4 h0 f, _2 V9 \; U3 v  I* ~你这个feeder的密度太高了吧?

CD603572813

回复 nichifanlema2 的帖子3 Z; [" Q/ K! L9 v# @" ~7 T  x
; L+ j5 S! n9 `* t
您BFGF的浓度一般用到多少呢？我买的是10微克一只的

CD603572813

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- a. u5 f$ L4 B( X! M
% q% R# j, n* \( Y我现在遇到了两个问题：一、已经分化了的细胞我还不知道该怎么处理掉，之前有人建议说挂掉，可我是养在培养瓶里面的，所以这个操作对我来说有点难，不知道您是怎么处理分化的细胞的？二、已经长大的克隆，您是怎么处理使其变小的？我用的是枪头吹打的，这样一来会产生很多起泡影响吹打的效果，同时这样吹打貌似对细胞的损伤也会比较大，不知道这个问题您是怎么处理的？谢谢啦

CD603572813

回复 Jonathan 的帖子$ _1 e' ]1 T- d$ ]4 J

( O; P( ]0 o5 U- \- k) g% D那您建议用什么密度更好一点呢？