求助：iPS诱导成功后挑取、增殖的方法，求方法详解，谢谢

不倒翁

直接在显微镜下挑，挑取的单克隆吸出来放到0.15%的胰酶里面消化五分钟，吹散后种到培养皿里面。维持的培养基看你自己试验需求了。不同版本的都可以维持下去。

不倒翁

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7 P5 h2 _5 w& X2 QFisher的玻璃针，烧了之后掰弯，再拉断。诱导的时候培养基是DMEM+15%gibco血清+NEAA+Glutmax+Sodium Pyruvate+β巯基乙醇+lif，挑出来之后在feeder上用这个培养基也可以，或者用2i+lif（austin他们的文章里面有配方F12：neuronbasal1:1+CHIR+PD+N2+B27+NEAA+Glutmax+Sodium Pyruvate+β巯基乙醇+lif）也行。2i可能有促进完全重编程的作用，养一阵子细胞就会变得很均一，状态很好。

不倒翁

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% [3 m! F; L2 Q4 P% ~1 V4 ~9 }这是小鼠的，人的挑取是一样的，但是消化还有medium就不一样了啊

不倒翁

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http://www.fishersci.com/ecomm/s ... PROD&hasPromo=0针是这个 挑取之前在酒精灯上拦腰烧软，用镊子压一下 让它弯曲大概九十度 然后放凉了再烧针尖，烧软之后用镊子夹着细的那一段拉 拉断 这样就留下一个比较光滑但是很细的头 然后喷酒精烧 消毒之后在显微镜下挑取克隆 一般是看好一个克隆 用这个针在克隆周围逐步画圈，把克隆剥离下来，再用枪吸出来。开始操作的时候有点技术难度，练练就好了，关键是手不抖。

不倒翁

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1 y* j# Y' P" ?' n: r+ ]好运